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wanglutasha

新虫 (初入文坛)

[求助] 凝胶渗透色谱 小分子肽 已有2人参与

最近用TSKgel2000凝胶色谱柱在HPLC上做小分子肽的分布,进标准样品(分子量分别为+10000Da和6500Da),发现没有峰,而且在23min时还出现倒峰,不知道什么原因啊,各位牛人求解释帮助啊~柱子是新买的,流动相是乙腈:水:三氟乙酸=10:90:0.1, UV=220nm,各种怀疑,今天突然想到我的标品和样品上机前都用0.45微米的滤膜过滤了,想问下0.45微米的滤膜一般截留分子量在多少啊,会不会把分子量稍大的肽给截留了所以没有出峰啊?各位帮帮啊,小的在这里先谢过了!!
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girlsearch

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你好,请问你当时用的什么标准品啊?
3楼2016-07-13 15:23:42
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shoucijiance

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感觉这个响应值会比较小,可以增大样品浓度和进样体积来检测。也可以试试磷酸盐缓冲液,出峰还比较好。虽然这个回答不一定帮助到你,毕竟三年了。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
把握今天,成就明天!稳重成熟的你一定会成功。
2楼2015-06-23 07:27:12
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