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yuliansheng

金虫 (小有名气)

[求助] 求引物设计

第一次做引物设计,一头雾水,什么都不太懂。查了一大堆资料,感觉还是不太会设计。求助大家,帮着给看看。我老师就我说了三句话——1,引物长度大概在20-30;2,引物中G和C多点好(查了一些资料,写着“引物GC含量在40%~60%之间,Tm 值最好接近72℃”);3,引物3'是G或C。序列如下:
GTGTTAATCACAGGAGGCAATAAAGGGTTAGGCTATGCAAGTGCAGAGGCACTTAAAGCATTGGGTTACAAAGTTTATATAGGTTCTCGGAATGATGTAAGAGGACAACAAGCATCACAAAAATTAGGTGTTCATTATGTACAGTTAGATGTTACAAGTGACTACTCAGTCAAAAATGCTTATAACATGATTGCTGAAAAAGAAGGCCGTCTTGATATCCTCATTAACAATGCAGGTATATCTGGTCAATTTTCAGCACCTTCCAAATTGACACCTCGTGACGTTGAAGAAGTATATCAAACGAATGTATTCGGTATCGTACGAATGATGAATACATTCGTCCCTCTCTTAGAAAAATCTGAACAACCTGTTGTCGTCAACGTATCAAGTGGTTTAGGTTCATTTGGAATGGTTACAAACCCCGAAACAGCTGAATCTAAAGTGAATTCATTAGCTTATTGTTCGTCTAAATCGGCAGTAACAATGCTAACGCTACAATACGCTAAAGGATTACCTAACATGCAAATCAATGCTGCTGATCCAGGCGCTACAAATACTGATTTAGTTGGTGATTTTAGTAATAATTCCAAACACGTTTCTGAAGGAATCAAGCCAATCATTCAATTAGCAACGATTGGTGCAGATGGCCCAACAGGTACATTTATTAATGGCGATGGAGAGATGCCTTGGTAGATCAATTTTATGTTACAAACATTGAAATTAGAGGTATATAAAAAATGCTTCTGCAATAGATGCAATAAACATGCAATACAATATGGAGGCGAAGTAAATGAAAAGTATTACGTTTGAAGAACATTATGTCATTGAAGATATTCAAAAAGAAACGATGAATGCGATATCAGCAGATCCTAAAGGTGTACCGATGAAAGTAATGTTAGAAGGCCTTGAAAAAAAGACAGGTTTTACAAATGCCGACGAATTATCACATCATGATGAACGTATCCAATTTATGAATAATCAAGACGTTCAAATTCAAG
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aofeng860308

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yuliansheng: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢回帖帮助 2012-08-08 09:08:10
保护碱基+酶切位点+GTGTTAATCACAGGAGGCAA
保护碱基+酶切位点+CTTGAATTTGAACGTCTTGAT

试试这对,应该没问题。
提供一个引物设计网站http://www.yeastgenome.org/cgi-bin/web-primer
5楼2012-08-04 15:38:58
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