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南方科技大学公共卫生及应急管理学院2025级博士研究生招生报考通知
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liuyu_sdili

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

楼主的PCR产物有杂带，这样的情况下酶切完做个胶回收比较保险些。最近做克隆也一直不顺，一个做了两周才成功，一个俩月都没结构，希望多交流经验~~~
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11楼2012-08-04 16:51:29
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ankang0910

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-09 14:24:38
引用回帖:
10楼: Originally posted by 475502411 at 2012-08-04 14:25:38
1.我的目的条带是PCR扩增出来的，当时没有看，直接回收的，但回收完有拖带
2.酶切得到的是不是比680bp大，没看出来，测序结果还没出来...

哦，那你是直接纯化的寡核苷酸是吗？肯定还是切胶回收的好一些呀，为什么不跑胶回收呢？PCR后、回收前有没有跑胶鉴定一下，说不定也是拖带呢，降低一下模板再试试。祝好运！
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实验顺利！！
12楼2012-08-04 16:53:42
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cmin126

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by luckyforus66 at 2012-08-01 16:02:59
实验室其他人用电转化时出过类似的问题，貌似用普通转化（热激转化）好一些。

我也出现了类似问题，目的片段是PCR产物，从基因组DNA P下来的。长的菌落很少，鉴定也都为假阳性，求教啊
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13楼2012-08-04 20:48:14
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王礼鹏

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你可以再看看你的目的片段680bp中是否也有BamHI和HindIIII这两个酶的酶切位点。祝实验顺利！！
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14楼2012-08-09 13:57:54
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山轻水秀

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

也许你连接的比例有问题哦
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万变不离其宗，以明确的计划，灵活的方法，创造属于自己的天地
15楼2012-08-09 16:27:12
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