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Darling大琳

新虫 (小有名气)

[交流] 急求高人指点——DGGE出现不明细条的背景!已有7人参与

菜鸟一枚,初次发帖,诚请各位牛人路过,指点迷津!

聚丙烯酰胺,胶梯度:25%-55%,厌氧细菌(10uL样品),银染。

染色之后,每个条带中央都会出现细条的背景,包括Marker也是,不知道是什么原因造成的。两个星期前用样品做都不会出现,后来就出现了,实在是想不通过!是胶的问题还是电泳槽的问题?该如何解决呢?

刚上小木虫,还没有赚过金币,小的只能诚心的在此祝愿大家实验顺利!!!
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137167741

至尊木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
看看上样缓冲液,有没有问题。
总有一天我要修改用户名。
2楼2012-07-28 09:28:54
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西区五号楼

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
会不会是染液的问题啊?你可以试着用EB染一下,如果没有细纹的话可能就是染色液的问题了。我们实验室使用EB染的。
3楼2012-07-28 10:40:02
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Darling大琳

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 137167741 at 2012-07-28 09:28:54
看看上样缓冲液,有没有问题。

谢谢您的回复~可是如果是样品的缓冲液,那么marker不应该也有问题呀?
4楼2012-07-28 11:54:40
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Darling大琳

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 西区五号楼 at 2012-07-28 10:40:02
会不会是染液的问题啊?你可以试着用EB染一下,如果没有细纹的话可能就是染色液的问题了。我们实验室使用EB染的。

染液一直都用的银染,好多年了,也没有出现过这种问题呀~您说会是胶的问题么?
5楼2012-07-28 11:56:41
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uneei

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你这个确实很奇特,关注一下!
6楼2012-07-28 20:19:37
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Darling大琳

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by uneei at 2012-07-28 20:19:37
你这个确实很奇特,关注一下!

多谢支持!
7楼2012-07-28 23:30:28
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西区五号楼

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by Darling大琳 at 2012-07-28 11:56:41
染液一直都用的银染,好多年了,也没有出现过这种问题呀~您说会是胶的问题么?...

自我感觉可能不是胶的问题,因为泳道旁边的胶没有问题啊!重新配个染液试试吧!加的上样Buffer没问题没问题吧?你们用的是什么Marker啊?
8楼2012-07-29 09:33:34
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Ljyshmily

木虫 (正式写手)

金龟子


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
想问一下楼主,现在DGGE做的怎么样了,我刚开始做,什么都不懂,我配的胶是40-60%   一般电压是70v   14h,但是效果很不好,希望指点一下
有奋斗有人生
9楼2012-07-29 18:33:55
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Darling大琳

新虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 西区五号楼 at 2012-07-29 09:33:34
自我感觉可能不是胶的问题,因为泳道旁边的胶没有问题啊!重新配个染液试试吧!加的上样Buffer没问题没问题吧?你们用的是什么Marker啊?...

嗯~好的,多谢指点!我们用的是DL2000
10楼2012-07-31 14:55:56
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