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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 急求高人指点——DGGE出现不明细条的背景！
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Darling大琳

新虫 (小有名气)

[交流] 急求高人指点——DGGE出现不明细条的背景！ 已有7人参与

菜鸟一枚，初次发帖，诚请各位牛人路过，指点迷津！

聚丙烯酰胺，胶梯度：25%-55%，厌氧细菌（10uL样品），银染。

染色之后，每个条带中央都会出现细条的背景，包括Marker也是，不知道是什么原因造成的。两个星期前用样品做都不会出现，后来就出现了，实在是想不通过！是胶的问题还是电泳槽的问题？该如何解决呢？

刚上小木虫，还没有赚过金币，小的只能诚心的在此祝愿大家实验顺利！！！
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1楼 2012-07-27 23:24:35
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137167741

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
看看上样缓冲液，有没有问题。
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总有一天我要修改用户名。
2楼2012-07-28 09:28:54
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西区五号楼

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
会不会是染液的问题啊？你可以试着用EB染一下，如果没有细纹的话可能就是染色液的问题了。我们实验室使用ＥＢ染的。
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3楼2012-07-28 10:40:02
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Darling大琳

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 137167741 at 2012-07-28 09:28:54
看看上样缓冲液，有没有问题。

谢谢您的回复~可是如果是样品的缓冲液，那么marker不应该也有问题呀？
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4楼2012-07-28 11:54:40
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Darling大琳

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 西区五号楼 at 2012-07-28 10:40:02
会不会是染液的问题啊？你可以试着用EB染一下，如果没有细纹的话可能就是染色液的问题了。我们实验室使用ＥＢ染的。

染液一直都用的银染，好多年了，也没有出现过这种问题呀~您说会是胶的问题么？
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5楼2012-07-28 11:56:41
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uneei

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你这个确实很奇特，关注一下！
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6楼2012-07-28 20:19:37
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Darling大琳

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by uneei at 2012-07-28 20:19:37
你这个确实很奇特，关注一下！

多谢支持！
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7楼2012-07-28 23:30:28
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西区五号楼

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by Darling大琳 at 2012-07-28 11:56:41
染液一直都用的银染，好多年了，也没有出现过这种问题呀~您说会是胶的问题么？...

自我感觉可能不是胶的问题，因为泳道旁边的胶没有问题啊！重新配个染液试试吧！加的上样Buffer没问题没问题吧？你们用的是什么Marker啊？
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8楼2012-07-29 09:33:34
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Ljyshmily

木虫 (正式写手)

金龟子
★
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想问一下楼主，现在DGGE做的怎么样了，我刚开始做，什么都不懂，我配的胶是40-60%   一般电压是70v   14h，但是效果很不好，希望指点一下
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有奋斗有人生
9楼2012-07-29 18:33:55
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Darling大琳

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 西区五号楼 at 2012-07-29 09:33:34
自我感觉可能不是胶的问题，因为泳道旁边的胶没有问题啊！重新配个染液试试吧！加的上样Buffer没问题没问题吧？你们用的是什么Marker啊？...

嗯~好的，多谢指点！我们用的是DL2000
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10楼2012-07-31 14:55:56
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