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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 高效液相色谱 熊果酸 无峰
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cangmangfei

金虫 (小有名气)

[求助] 高效液相色谱 熊果酸 无峰

这两天做高效液相色谱法测样品中熊果酸含量，结果发现：熊果酸的峰无法清晰显现出来（峰高几乎没有，峰面积恰过7位数），而另有一峰峰高达到2000，峰面积达到8位数。
色谱柱:C18，流动相：乙腈：0.1%磷酸=80:20.
请问：怎样才能让不需要的高峰变不明显，把熊果酸的峰清晰显现出来呢？
已经难倒数个老师，高手请出着，若有好办法，非常感谢
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花样化石
1楼 2012-07-25 20:22:54
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文少520

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
soundhorizo: 金币+1 2012-07-30 09:09:35
请问LZ，你所用的波长是熊果酸的最大吸收波长吗？还有从LZ的叙述上看，峰高达到2000多，峰面积才8位数，而熊果酸得峰面积达到7位数却看不到峰高，那么熊果酸的色谱峰是不是又矮又胖？？若是这样，则说明是柱子对熊果酸的保留太强，LZ需要加大乙腈的比例试试
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我是小虫，我要升级
2楼2012-07-25 20:36:47
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yugijiang

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
看一下你的吸收是如何的，选择吸收较强的波长来做。
你的方法是在开发中还是？这个应该有很多文献可以参考的吧，多看看先
赞一下 回复此楼
3楼2012-07-25 22:03:13
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cangmangfei

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 文少520 at 2012-07-25 20:36:47
请问LZ，你所用的波长是熊果酸的最大吸收波长吗？还有从LZ的叙述上看，峰高达到2000多，峰面积才8位数，而熊果酸得峰面积达到7位数却看不到峰高，那么熊果酸的色谱峰是不是又矮又胖？？若是这样，则说明是柱子对熊果 ...

谢谢回帖！
最大吸收波长为210nm左右，前一个较大峰是丁香苷，最大吸收峰为230左右。我们用了210nm-200nm测。熊果酸是基本上看不到峰。
目的：突出熊果酸的峰，削减或消除丁香苷的峰。
有办法吗？变波长这条路走不通。
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花样化石
4楼2012-07-26 09:29:38
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cangmangfei

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by yugijiang at 2012-07-25 22:03:13
看一下你的吸收是如何的，选择吸收较强的波长来做。
你的方法是在开发中还是？这个应该有很多文献可以参考的吧，多看看先

谢谢回帖！
已经是熊果酸最大吸收波长，没有找到丁香苷和熊果酸一起做的。
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花样化石
5楼2012-07-26 09:32:07
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liangchangyu

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你可以先制备走纯，把丁香苷去掉在走hplc
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不在乎曾经拥有，只在乎天长地久。
6楼2012-07-27 13:29:13
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tristone3812

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1.调整最佳吸收波长
2.梯度洗脱
3.酸的量加大点，比如0.5%H3PO4
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7楼2012-07-27 13:56:32
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cangmangfei

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by liangchangyu at 2012-07-27 13:29:13
你可以先制备走纯，把丁香苷去掉在走hplc

谢谢！
已经提纯了，就是想测下这种植物中它的含量，然后把图片附在论文上。
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花样化石
8楼2012-07-27 20:14:41
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cangmangfei

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by tristone3812 at 2012-07-27 13:56:32
1.调整最佳吸收波长
2.梯度洗脱
3.酸的量加大点，比如0.5%H3PO4

谢谢！
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花样化石
9楼2012-07-27 20:15:39
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xx小小xx

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
soundhorizo: 金币+2, 感谢应助 欢迎常来分析版交流指导^^ 2012-07-30 09:10:14
应该有两个问题：
目标物无共轭双键，只有羰基吸收，吸光系数太小
目标物疏水性太强，应提高乙腈的比例

由于用的检测波长太低，不建议用梯度洗脱
如果是已经提纯的样品，而色谱图只是作为参考，建议用RID检测器，由于目标物与杂质的响应系数在RID上比较接近，所以得到的谱图会好看些
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10楼2012-07-28 16:12:20
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