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profax

铁虫 (小有名气)

[求助] 酶活测定时,为什么不加酶液的对照吸光度变化很快,而加了酶液的样品反而非常稳定?

要崩溃了,药品配制,操作方法应该都没有什么问题啊。。。

[ Last edited by profax on 2012-7-24 at 01:49 ]
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xyz7819227

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
第一点,酶活的测定是加了酶液的样品吸光度与对照组吸光度的比较啊,而不是看谁变化快啊。
第二点,你的对照组溶液可能不稳定,你可以做一下该溶液的稳定性试验。
海纳百川,有容乃大
2楼2012-07-24 14:14:03
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profax

铁虫 (小有名气)

我是从参考文献上面找到的测定方法,如果对照组溶液不稳定,是不是说明这个方法不可靠?谢谢。
3楼2012-07-24 20:52:35
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profax

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xyz7819227 at 2012-07-24 14:14:03
第一点,酶活的测定是加了酶液的样品吸光度与对照组吸光度的比较啊,而不是看谁变化快啊。
第二点,你的对照组溶液可能不稳定,你可以做一下该溶液的稳定性试验。

我测定X酶的酶活基本原理是:A+B+C==D+E,这个反应是在酶X的催化下进行的,吸光度是测的生成物质D的吸光度,而对照溶液是没有加入X酶,用蒸馏水替代。
问题来了,对照吸光度在前三分钟内一直下降,而样品溶液的吸光度及其稳定。
求赐教。
4楼2012-07-24 20:57:58
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xyz7819227

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

那确实说明你的对照组溶液不稳定,但是换个角度想,这恰恰又证明了X酶具有一定的活性,生成的D能够维持溶液的稳定性。主要看你要的是什么以及你如何去分析了。
海纳百川,有容乃大
5楼2012-07-24 21:06:44
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profax

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by xyz7819227 at 2012-07-24 21:06:44
那确实说明你的对照组溶液不稳定,但是换个角度想,这恰恰又证明了X酶具有一定的活性,生成的D能够维持溶液的稳定性。主要看你要的是什么以及你如何去分析了。

额,不好意思,上面说错了,测定的是反应物A的吸光度的。。。而酶X的作用是催化A的氧化反应,照理讲A的吸光度应该是降低的,但是现在很稳定。
6楼2012-07-24 21:17:59
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xyz7819227

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

额。。。酶活测不出来很正常的,这就要从根本上找原因了,你的酶是从哪来的?微生物培养发酵产的?
海纳百川,有容乃大
7楼2012-07-24 21:20:21
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profax

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by xyz7819227 at 2012-07-24 21:20:21
额。。。酶活测不出来很正常的,这就要从根本上找原因了,你的酶是从哪来的?微生物培养发酵产的?

啊,很正常的吗?酶是用植物果实提取的粗酶液。。。提取液的配方也是从文献上面找的
8楼2012-07-24 21:22:31
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zcy1214

木虫 (著名写手)

普通青年

兄弟,我也要测酶活,请问你测的是什么的酶啊
达则兼济天下,穷则独善其身
9楼2012-07-28 11:28:10
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profax

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by zcy1214 at 2012-07-28 11:28:10
兄弟,我也要测酶活,请问你测的是什么的酶啊

我测的抗坏血酸氧化酶那些
10楼2012-08-02 19:09:50
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