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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教关于酶稳定性的问题
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whynotbest

至尊木虫 (职业作家)

淫虫

[求助] 请教关于酶稳定性的问题

本人不是搞这一块儿的，所以对酶这方面不怎么懂。
我现在实验需要用到谷胱甘肽转移酶A1（GSTα）
去年11月买了一个50μg的，一直放在-20保存
最近打算做实验拿出来用，看到网上说酶反复冻融对活性影响很大，请问一下我是应该把酶分装一下吗？
还有，看到有人说，酶里面如果加了甘油，在-20度是不会冻住的，我看了一下我这个酶的配方，里面提到含10%的甘油，如果这样的话，我是不是不用担心反复冻融的问题呢？
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WorkFinishPublish
1楼 2012-07-23 17:47:23
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by whynotbest at 2012-07-24 09:47:50
还想请教一下，分装或者实验的时侯温度应该怎么控制呢？
看到有人说要把酶先从-20放到-4，然后操作什么的尽量都在0度完成，是这样吗？...

一般放在冰上或者冰盒里就可以了
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5楼2012-07-24 18:42:27
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robert-RBT

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
whynotbest: 金币+3, ★有帮助, 谢谢！ 2012-07-24 09:46:22
甘油对蛋白质有一定的保护作用，但反复的温度变化也会影响酶的活性。为了保证实验条件的一致性和重复性，最好分装。
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2楼2012-07-23 21:33:20
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
whynotbest: 金币+3, ★有帮助, 谢谢！ 2012-07-24 09:46:33
甘油的存在使得酶溶液不会结冰，但是如果用量小的话还是建议分装，由于你多次使用反复的从-20℃到室温这个过程也会影响酶活性。希望对你有帮助。
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3楼2012-07-24 08:42:10
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whynotbest

至尊木虫 (职业作家)

淫虫
引用回帖:
3楼: Originally posted by joan198108 at 2012-07-24 08:42:10
甘油的存在使得酶溶液不会结冰，但是如果用量小的话还是建议分装，由于你多次使用反复的从-20℃到室温这个过程也会影响酶活性。希望对你有帮助。

还想请教一下，分装或者实验的时侯温度应该怎么控制呢？
看到有人说要把酶先从-20放到-4，然后操作什么的尽量都在0度完成，是这样吗？
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WorkFinishPublish
4楼2012-07-24 09:47:50
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