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whynotbest

至尊木虫 (职业作家)

淫虫

[求助] 请教关于酶稳定性的问题

本人不是搞这一块儿的,所以对酶这方面不怎么懂。
我现在实验需要用到谷胱甘肽转移酶A1(GSTα)
去年11月买了一个50μg的,一直放在-20保存
最近打算做实验拿出来用,看到网上说酶反复冻融对活性影响很大,请问一下我是应该把酶分装一下吗?
还有,看到有人说,酶里面如果加了甘油,在-20度是不会冻住的,我看了一下我这个酶的配方,里面提到含10%的甘油,如果这样的话,我是不是不用担心反复冻融的问题呢?
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WorkFinishPublish
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
whynotbest: 金币+3, 有帮助, 谢谢! 2012-07-24 09:46:33
甘油的存在使得酶溶液不会结冰,但是如果用量小的话还是建议分装,由于你多次使用反复的从-20℃到室温这个过程也会影响酶活性。希望对你有帮助。
3楼2012-07-24 08:42:10
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robert-RBT

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
whynotbest: 金币+3, 有帮助, 谢谢! 2012-07-24 09:46:22
甘油对蛋白质有一定的保护作用,但反复的温度变化也会影响酶的活性。为了保证实验条件的一致性和重复性,最好分装。
2楼2012-07-23 21:33:20
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whynotbest

至尊木虫 (职业作家)

淫虫

引用回帖:
3楼: Originally posted by joan198108 at 2012-07-24 08:42:10
甘油的存在使得酶溶液不会结冰,但是如果用量小的话还是建议分装,由于你多次使用反复的从-20℃到室温这个过程也会影响酶活性。希望对你有帮助。

还想请教一下,分装或者实验的时侯温度应该怎么控制呢?
看到有人说要把酶先从-20放到-4,然后操作什么的尽量都在0度完成,是这样吗?
WorkFinishPublish
4楼2012-07-24 09:47:50
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by whynotbest at 2012-07-24 09:47:50
还想请教一下,分装或者实验的时侯温度应该怎么控制呢?
看到有人说要把酶先从-20放到-4,然后操作什么的尽量都在0度完成,是这样吗?...

一般放在冰上或者冰盒里就可以了
5楼2012-07-24 18:42:27
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