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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 植物叶片Evans blue染色
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tiani_tan

金虫 (小有名气)

[求助] 植物叶片Evans blue染色

求教：
Evans blue溶液怎么配制，多大浓度，pH？植物叶片染色后测OD600怎么开展？
急求详细一点的步骤。
做完了叶绿素测定，但老板说补充一下evans blue。
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1楼 2012-07-22 11:40:57
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ...
感谢参与，应助指数 +1
tiani_tan: 金币+50, ★★★很有帮助, 谢谢，很有用 2012-07-22 15:30:50
amisking: 回帖置顶 2012-07-22 19:37:21
tiani_tan: 金币+20, ★★★很有帮助 2012-07-22 20:53:23
tiani_tan: 金币+30 2012-07-22 20:54:13
植物组织活力通过依文思蓝染色法测定，方法参考Baker等（1994）报道[Baker CJ, Mock NM. An improved method for monitoring cell death in cell suspension and leaf disc assays using evans blue[J]. Plant Cell Tissue Organ Cult, 1994, 39(1): 7-12]，略作修改。将0.2 g鲜重植物材料置于0.25%依文思蓝溶液中，室温下染色10 min，双蒸水清洗至无蓝色洗出，在体式显微镜下拍照。之后将已染色植物材料浸入SDS-甲醇溶液中，50℃水浴1 h，过滤，取滤液测定595 nm波长处吸光度值。植物材料活力以595 nm处吸光度值表征，吸光度越高表示活力较低。
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2楼2012-07-22 15:04:53
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tiani_tan

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2012-07-22 15:04:53
植物组织活力通过依文思蓝染色法测定，方法参考Baker等（1994）报道，略作修改。将0.2 g鲜重植物材料置于0.25%依文思蓝溶液中，室温下染色10 min，双蒸水清洗至无蓝色洗出，在体式显微镜下拍照。之后将已染色植物材 ...

请教一下
0.25%evan blue用什么配制？有pH要求吗？在体式显微镜观察前需不需要脱色处理（烟草叶盘）？SDS-甲醇溶液，多大浓度？
谢谢。第一次做这个实验，相关细节不太清楚。
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3楼2012-07-22 15:33:21
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by tiani_tan at 2012-07-22 15:33:21
请教一下
0.25%evan blue用什么配制？有pH要求吗？在体式显微镜观察前需不需要脱色处理（烟草叶盘）？SDS-甲醇溶液，多大浓度？
谢谢。第一次做这个实验，相关细节不太清楚。...

依文思蓝蒸馏水溶，50%甲醇-1%SDS，不需要脱色
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4楼2012-07-22 16:16:02
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tiani_tan

金虫 (小有名气)
非常感谢，先试试！！
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5楼2012-07-22 20:52:42
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流年si水

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by starseacow at 2012-07-22 16:16:02
依文思蓝蒸馏水溶，50%甲醇-1%SDS，不需要脱色...

请问提取根尖染料时SDS-甲醇溶液的用量是多少
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6楼2015-07-22 21:27:42
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 流年si水 at 2015-07-22 21:27:42
请问提取根尖染料时SDS-甲醇溶液的用量是多少...

我统一是在1.5 ml EP管里加800 微升提取
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7楼2015-07-22 22:09:32
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