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tiani_tan

金虫 (小有名气)

[求助] 植物叶片Evans blue染色

求教:
Evans blue溶液怎么配制,多大浓度,pH?植物叶片染色后测OD600怎么开展?
急求详细一点的步骤。
做完了叶绿素测定,但老板说补充一下evans blue。
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
tiani_tan: 金币+50, ★★★很有帮助, 谢谢,很有用 2012-07-22 15:30:50
amisking: 回帖置顶 2012-07-22 19:37:21
tiani_tan: 金币+20, ★★★很有帮助 2012-07-22 20:53:23
tiani_tan: 金币+30 2012-07-22 20:54:13
植物组织活力通过依文思蓝染色法测定,方法参考Baker等(1994)报道[Baker CJ, Mock NM. An improved method for monitoring cell death in cell suspension and leaf disc assays using evans blue[J]. Plant Cell Tissue Organ Cult, 1994, 39(1): 7-12],略作修改。将0.2 g鲜重植物材料置于0.25%依文思蓝溶液中,室温下染色10 min,双蒸水清洗至无蓝色洗出,在体式显微镜下拍照。之后将已染色植物材料浸入SDS-甲醇溶液中,50℃水浴1 h,过滤,取滤液测定595 nm波长处吸光度值。植物材料活力以595 nm处吸光度值表征,吸光度越高表示活力较低。
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
2楼2012-07-22 15:04:53
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tiani_tan

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2012-07-22 15:04:53
植物组织活力通过依文思蓝染色法测定,方法参考Baker等(1994)报道,略作修改。将0.2 g鲜重植物材料置于0.25%依文思蓝溶液中,室温下染色10 min,双蒸水清洗至无蓝色洗出,在体式显微镜下拍照。之后将已染色植物材 ...

请教一下
0.25%evan blue用什么配制?有pH要求吗?在体式显微镜观察前需不需要脱色处理(烟草叶盘)?SDS-甲醇溶液,多大浓度?
谢谢。第一次做这个实验,相关细节不太清楚。
3楼2012-07-22 15:33:21
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

引用回帖:
3楼: Originally posted by tiani_tan at 2012-07-22 15:33:21
请教一下
0.25%evan blue用什么配制?有pH要求吗?在体式显微镜观察前需不需要脱色处理(烟草叶盘)?SDS-甲醇溶液,多大浓度?
谢谢。第一次做这个实验,相关细节不太清楚。...

依文思蓝蒸馏水溶,50%甲醇-1%SDS,不需要脱色
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4楼2012-07-22 16:16:02
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tiani_tan

金虫 (小有名气)

非常感谢,先试试!!
5楼2012-07-22 20:52:42
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流年si水

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by starseacow at 2012-07-22 16:16:02
依文思蓝蒸馏水溶,50%甲醇-1%SDS,不需要脱色...

请问提取根尖染料时SDS-甲醇溶液的用量是多少
6楼2015-07-22 21:27:42
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 流年si水 at 2015-07-22 21:27:42
请问提取根尖染料时SDS-甲醇溶液的用量是多少...

我统一是在1.5 ml EP管里加800 微升提取
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7楼2015-07-22 22:09:32
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