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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » DH5a感受态细胞制备问题
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yuliansheng

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-07-24 13:37:28
建议在从固体培养基挑取菌落时，挑单菌落，在液体培养基中培养时是在30℃培养，包括之后的培养。一般的话培养三个多小时OD660就能达到0.5，之后的操作就全是在冰上了
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学习....
11楼2012-07-24 10:11:52
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yuliansheng

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

建议在从固体培养基挑取菌落时，挑单菌落，在液体培养基中培养时是在30℃培养，包括之后的培养。一般的话培养三个多小时OD660就能达到0.5，之后的操作就全是在冰上了
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学习....
12楼2012-07-24 10:13:01
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脱水拂空

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
同意楼上的 没有必要非多少OD值 你自己做多了就知道啦 一般看着浑浊就可以啦
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13楼2012-07-24 10:50:38
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jingdejun

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我个人觉得是最后一步的培养基加多了。

一般我们用容器培养微生物，培养基的量不能超过容器总体积的20%。

至于测不测OD的，我觉得还是测一下好。有经验的话，用肉眼判断也行。

最后，楼主啊，针对你这种没做过感受态的同学，直接买感受态不就行了吗！！     也不贵啊。祝实验顺利！
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14楼2012-07-24 20:37:22
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含羞草liu

新虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by jingdejun at 2012-07-24 20:37:22
我个人觉得是最后一步的培养基加多了。

一般我们用容器培养微生物，培养基的量不能超过容器总体积的20%。

至于测不测OD的，我觉得还是测一下好。有经验的话，用肉眼判断也行。

最后，楼主啊，针对你这种没 ...

，想自己做感受态，熟悉一下过程……
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努力，奋斗，拼搏。。。
15楼2012-07-25 17:44:31
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mokoko6

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我们一般都是50ml(250锥形瓶)LB，你检测OD是不是有问题啊，换台机器试试
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16楼2013-03-20 10:35:15
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谁是来迟的莞

新虫 (初入文坛)
我也有过！但是情况是接种好的菌种长了16小时，从第一天晚9点到第二天上午十一点，长势很慢！本来度放弃了，突然从下午一点到三点又涨起来了，提取结果是什么度没有！一直搞不明白为什么！
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17楼2013-05-23 10:46:08
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