| 查看: 1796 | 回复: 3 | |||
qingtingzhe银虫 (正式写手)
步行者
|
[求助]
质粒pETDuet-1的提取
|
|
各位分子克隆高手： 我现在双基因共表达，pETDuet-1质粒很难提，连第一个基因的时候，提的浓度很低，但勉强可以用。但连完第一个基因后，再提取质粒每次都是失败。经过pCR验证里面是有那个质粒，但就是提不出来。我的条件如此：接种至有amp的LB培养基，过夜，菌液至浑浊，再加氯霉素四五个小时培养，增加拷贝数。加氯霉素前和氯霉素后的菌液中均提不出质粒。我试过分子克隆中的质粒中提和试剂盒的小量制备，效果均不好。下图中最最左面的三条带为我提取的pACYCDuet-1，最右面的两条带为我提取的pETDuet-1质粒。两个质粒同时提取的，为什么pETDuet-1在带有一个基因提不出来了？ 希望大家提出宝贵的建议！  |
回复此楼» 猜你喜欢
323求调剂
已经有6人回复
-
一志愿北京化工大学 070300 学硕 336分 求调剂
已经有4人回复
-
352求调剂
已经有3人回复
-
一志愿东华大学化学070300，求调剂
已经有8人回复
-
277材料科学与工程080500求调剂
已经有7人回复
-
317求调剂
已经有18人回复
-
293求调剂
已经有5人回复
-
280分求调剂 一志愿085802
已经有7人回复
-
0854电子信息求调剂
已经有3人回复
-
263求调剂
已经有4人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
reallpf
木虫 (正式写手)
- MicEPI: 21
- 应助: 150 (高中生)
- 金币: 3388.3
- 散金: 2
- 红花: 12
- 帖子: 342
- 在线: 72.6小时
- 虫号: 1892494
- 注册: 2012-07-14
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
2楼2012-07-21 19:07:58
qingtingzhe
银虫 (正式写手)
步行者
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1218.9
- 散金: 271
- 红花: 3
- 帖子: 410
- 在线: 75.1小时
- 虫号: 1188203
- 注册: 2011-01-12
- 性别: GG
- 专业: 病毒学
3楼2012-07-22 11:18:42
13849108326
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 24.3
- 散金: 10
- 帖子: 14
- 在线: 2.9小时
- 虫号: 9668075
- 注册: 2018-07-29
- 专业: 生物信息学
4楼2018-09-15 10:22:55
