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[求助]
粗酶液的提纯
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最近在做真菌胞外酶的Native-PAGE，可是有几个样品胞外酶浓度太低，怕跑不出条带，求前辈们指点下如何能简单地提高粗酶液中酶的浓度而又不会破坏酶的活性 |
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zhang8826857: 金币+1, MicEPI+1, 我们的专家就是给力！！！！ 2012-07-20 21:20:08
王之御魂: 金币+10, ★★★很有帮助 2012-07-20 22:31:08
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zhang8826857: 金币+1, MicEPI+1, 我们的专家就是给力！！！！ 2012-07-20 21:20:08
王之御魂: 金币+10, ★★★很有帮助 2012-07-20 22:31:08
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透析时，物质会从浓度高的地方转移至浓度低的地方，所以如果透析外液的盐浓度比酶液的高，就会使酶液里的水出来，使体积变小，但是盐浓度变高之后跑胶条带会更加不清楚，不行的；如果透析外液的盐浓度比酶液的低，水就会进入酶液，使体积变大，更加看不清条带。 如果是超滤，可以除盐也可以浓缩体积，但是酶液要先除固体颗粒，因为滤膜堵了就浓缩不了。即使清洗了，也还会有一些残留，久了会堵塞的。 我觉得可以先旋转蒸发或者冻干浓缩体积，再脱盐（透析或者G25脱盐都行），这样可以获得低盐且体积小的样品。 |
4楼2012-07-20 21:03:29
