24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2690  |  回复: 6
本帖产生 1 个 MicEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

王之御魂

木虫 (小有名气)

[求助] 粗酶液的提纯

最近在做真菌胞外酶的Native-PAGE,可是有几个样品胞外酶浓度太低,怕跑不出条带,求前辈们指点下如何能简单地提高粗酶液中酶的浓度而又不会破坏酶的活性
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陈年芬芳

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
4楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2012-07-20 21:03:29
透析时,物质会从浓度高的地方转移至浓度低的地方,所以如果透析外液的盐浓度比酶液的高,就会使酶液里的水出来,使体积变小,但是盐浓度变高之后跑胶条带会更加不清楚,不行的;如果透析外液的盐浓度比酶液的低,水 ...

学习了,透析后盐浓度高了会使电泳条带更不清晰啊,这个之前真没注意。另外每页先除固体课题直接离心还是怎么做呢?
5楼2012-07-20 21:51:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

王之御魂

木虫 (小有名气)

跑柱子什么的方法不适用,实验室没有这方面器材
2楼2012-07-20 10:43:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流问题。 2012-07-20 18:41:07
那比较方便的就是使用透析了,比较简单,直接。速度相对来说还行,可以试试看。
另外不要因为浓度低就怕跑不出条带,你不跑试试怎么知道呢?先尝试一下,然后再做做透析看看吧。
因为如果只是为了跑SDS-PAGE就做透析实在不值得。
3楼2012-07-20 12:06:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, MicEPI+1, 我们的专家就是给力!!!! 2012-07-20 21:20:08
王之御魂: 金币+10, ★★★很有帮助 2012-07-20 22:31:08
透析时,物质会从浓度高的地方转移至浓度低的地方,所以如果透析外液的盐浓度比酶液的高,就会使酶液里的水出来,使体积变小,但是盐浓度变高之后跑胶条带会更加不清楚,不行的;如果透析外液的盐浓度比酶液的低,水就会进入酶液,使体积变大,更加看不清条带。

如果是超滤,可以除盐也可以浓缩体积,但是酶液要先除固体颗粒,因为滤膜堵了就浓缩不了。即使清洗了,也还会有一些残留,久了会堵塞的。

我觉得可以先旋转蒸发或者冻干浓缩体积,再脱盐(透析或者G25脱盐都行),这样可以获得低盐且体积小的样品。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2012-07-20 21:03:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 352分 化工与材料 +3 海纳百川Ly 2026-03-27 3/150 2026-03-27 17:18 by 杨杨杨紫
[考研] 308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-25 7/350 2026-03-27 14:47 by 狂炫麦当当
[考研] 化学308分求调剂 +8 你好明天你好 2026-03-23 9/450 2026-03-27 14:01 by 杨光于青云
[考研] 316求调剂 +5 Pigcasso 2026-03-24 5/250 2026-03-27 12:10 by zhshch
[考研] 求调剂,一志愿 南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕 +4 @taotao 2026-03-26 5/250 2026-03-27 08:10 by hypershenger
[考研] 304材料求调剂 +4 钟llll 2026-03-26 4/200 2026-03-27 03:42 by wxiongid
[考研] 343求调剂 +4 赠我一本书 2026-03-23 4/200 2026-03-27 00:40 by wxiongid
[考研] 一志愿北化求调剂 +3 Jsman 2026-03-22 3/150 2026-03-26 21:06 by ajpv风雷
[考研] 324求调剂 +4 wysyjs25 2026-03-21 4/200 2026-03-26 20:38 by fmesaito
[考研] 281求调剂 +3 亚克西good 2026-03-26 5/250 2026-03-26 19:48 by 不吃魚的貓
[考研] 281求调剂 +6 Koxui 2026-03-24 7/350 2026-03-26 15:37 by 无际的草原
[考研] 调剂310 +3 温柔的晚安 2026-03-25 4/200 2026-03-25 23:16 by peike
[考研] 求调剂 +3 QiMing7 2026-03-25 3/150 2026-03-25 21:13 by 给你你注意休息
[考研] 材料专硕 335 分求调剂 +4 拒绝冷暴力 2026-03-25 4/200 2026-03-25 18:45 by haxia
[考研] 302求调剂 +4 锦衣卫藤椒 2026-03-25 4/200 2026-03-25 16:29 by 功夫疯狂
[有机交流] 有机合成求助 20+3 FENGSHUJEI 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:31 by 88817753
[考研] 344求调剂 +3 desto 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:09 by 搏击518
[考研] 280分求调剂 一志愿085802 +4 PUMPT 2026-03-22 7/350 2026-03-22 22:13 by 星空星月
[考研] 求调剂一志愿海大,0703化学学硕304分,有大创项目,四级已过 +6 幸运哩哩 2026-03-22 10/500 2026-03-22 20:10 by edmund7
[考研] 330求调剂0854 +3 assdll 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:01 by 搏击518
信息提示
请填处理意见