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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 16S rDNA测序问题
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xinongfish

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我刚做完类似的实验，建议你做个克隆吧，把你胶回收的产物，进行载体链接、转化到大肠杆菌，然后进行蓝白斑筛选，挑取白色单克隆，摇菌，PCR检测，然后测序。这样比较保险。
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11楼2012-07-21 23:21:44
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zhaoyu2881

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

如果LZ能保证菌是纯的话，建议换家测序公司试一试，有时候同样的样品，不同的测序公司就给反馈出的结果差异很大。我们这边有时候还会直接做菌落PCR，也一样送出去测序，拿到结果。
生理生化的鉴定指标有很多，很多文献都会有提到，建议可以参考文献。再者生理生化和16可以同步进行啊，互不矛盾的~~
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Thatislife,onlylifehurts.
12楼2012-07-24 18:18:59
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wubingqi

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

连接载体转化后再测吧，发文章不在这写，很多地方时不承认的
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13楼2012-07-24 18:30:48
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tankleiming

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

既然是单菌落，自己pcr什么的不是钱啊，花个400块钱让他们直接鉴定不久搞定了
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之所以深沉
14楼2012-07-24 21:25:12
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tankleiming

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

听我的亲，花个3.4百块钱，直接让他们公司的鉴定到属，在根据属来做生化，很多情况下可以确定种了，一般一个礼拜就搞定了，他们说的什么pcr，连载体什么的完全是蛋疼啊，
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之所以深沉
15楼2012-07-24 21:28:43
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萌萌李萌萌

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

直接把菌液给公司，让他们给PCR不行吗？可以打测序公司询问一下吧~
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16楼2012-09-28 10:12:30
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beishui

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

连T载，挑单菌，直接去测序
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宠辱不惊，看庭前花开花落；去留无意，望天上云卷云舒。
17楼2012-09-29 14:44:35
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家住前寨

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

有谁知道16sRNA测序的公司的网址吗！做的比较好的有哪些公司？
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18楼2012-10-10 16:02:16
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cui_2013

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
18楼: Originally posted by 家住前寨 at 2012-10-10 16:02:16
有谁知道16sRNA测序的公司的网址吗！做的比较好的有哪些公司？

美吉生物做微生物很不错，可以看看
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19楼2014-05-05 11:05:19
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cui_2013

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

美吉生物做微生物不错，华大基因做测序很牛，可以参考下
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20楼2014-05-05 11:06:39
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