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smdsfy

铜虫 (小有名气)

[交流] 载体的构建 已有1人参与

载体构建的最后的验证一般包括PCR和双酶切鉴定,插入体与载体连接后,在相应的抗性平板上长出单克隆,挑取的单克隆做菌液PCR能P出插入体的条带,但将重组质粒提出来在做双酶切时,却切不出插入体的额条带,请问这是为什么,哪位高手帮我好好分析一下,不甚感激啊!
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tianyinghu

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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请说清楚你菌液PCR能P出插入体的条带,用的是什么引物,载体的抗性,模板的抗性,因为我怀疑很有可能是你用的是PCR引物鉴定的,而长出来的是模板质粒的菌,当然也有可能你没有切全的原因,你可以换个酶切位点切切看。
2楼2012-07-17 15:03:17
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