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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 农林 » 农林综合 » 关于胶体金免疫层析试纸条所使用的抗体问题
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xfn106

金虫 (初入文坛)

[求助] 关于胶体金免疫层析试纸条所使用的抗体问题

各位，我准备做胶体免疫层析试纸条，但是，我想请问一下，试纸条胶金垫上的与胶体金结合的抗体和检测线上喷划的抗体是同一种吗？如果是同一种，抗原在经过胶金垫的时候就与抗体结合了，在经过检测线的时候应该就没有结合位点再和同一种抗体结合了吧？这里的抗体都是用的多克隆抗体。谢谢
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1楼2012-07-15 19:34:25
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liligan

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

双抗体夹心法检测，包被抗体和金标记抗体使用多抗是可以的，但灵敏度会低一点，一般情况下，可以用单抗作为包被抗体，多抗用于金标记抗体。
但如果包被抗体和金标记抗体使用同一个多抗，一般情况下是不行的，主要是两个抗体相同的话，金标记抗体和抗原反应时，所有的抗原位点都会和金标记抗体反应，包被抗体就无法反应了。
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12楼2013-07-01 12:17:48
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普通回帖

wfs0620

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

肯定不是同一中。是这样的。
楼主应该用的是双抗体夹心法检测。两个抗体A，B.分别对应检测目标物的抗原决定簇a,b.(A-a   B-b)
金标垫上是A抗体，检测线上就是B抗体。这样就可以再检测到目标物了。
至于多克隆抗体，也是针对不同抗原决定簇的（不同的克隆号，细胞株），不能用一样的，否则没有办法检测到目标物的。
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xfn106
继续加油
2楼2012-08-09 11:20:58
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xfn106

金虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by wfs0620 at 2012-08-09 11:20:58
肯定不是同一中。是这样的。
楼主应该用的是双抗体夹心法检测。两个抗体A，B.分别对应检测目标物的抗原决定簇a,b.(A-a   B-b)
金标垫上是A抗体，检测线上就是B抗体。这样就可以再检测到目标物了。
至于多克隆抗体 ...

太谢谢你了，等了好久，终于有你回答我啦!
我还想请教，我现在手头上就只有一种多克隆抗体，是不能做胶体金试纸条是吧？一定要2种？可是我想问怎么才能得到2种不同的多克隆抗体呢？
多抗不是针对很多的抗原决定簇吗？有没有可能抗原与金标垫上的多抗部分位点结合，移动到检测线上后抗原其他没被金标抗体结合的位点再与同种多抗的其他位置相应结合从而被富集下来显色？
我就是没弄懂要怎么才能算不一样的多抗？不同兔子个体免疫出来的同种病毒的抗体是不是就是有区别的多抗？拜托了
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3楼2012-08-10 22:27:01
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华俊

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
xfn106: 金币+5, 谢谢你了，可是通过你的回答我还是没弄清我的疑问。。。 2012-08-28 11:13:56
引用回帖:
3楼: Originally posted by xfn106 at 2012-08-10 22:27:01
太谢谢你了，等了好久，终于有你回答我啦!
我还想请教，我现在手头上就只有一种多克隆抗体，是不能做胶体金试纸条是吧？一定要2种？可是我想问怎么才能得到2种不同的多克隆抗体呢？
多抗不是针对很多的抗原决定簇 ...

我想可以用同一种抗原免疫不同的动物吧，例如大鼠、兔子等
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多一份快乐少一分烦恼！
4楼2012-08-28 00:00:41
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释梦110

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wfs0620 at 2012-08-09 11:20:58
肯定不是同一中。是这样的。
楼主应该用的是双抗体夹心法检测。两个抗体A，B.分别对应检测目标物的抗原决定簇a,b.(A-a   B-b)
金标垫上是A抗体，检测线上就是B抗体。这样就可以再检测到目标物了。
至于多克隆抗体 ...

我们做的双抗原夹心法中，有的产品中标记的和检测线上的抗原是同一种，血清中抗体经过金标垫时，形成抗原抗体复合物，然后复合物与检测线上的抗原结合，显色。双抗体夹心法也可以吧！目前还是初学者，多多指教，这个问题我也还在纠结中
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xfn106
对不起是一种真诚，没关系是一种风度。如果你付出了真诚，却得不到风度，那只能说明对方的无知与粗俗。
5楼2012-08-29 20:03:30
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释梦110

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wfs0620 at 2012-08-09 11:20:58
肯定不是同一中。是这样的。
楼主应该用的是双抗体夹心法检测。两个抗体A，B.分别对应检测目标物的抗原决定簇a,b.(A-a   B-b)
金标垫上是A抗体，检测线上就是B抗体。这样就可以再检测到目标物了。
至于多克隆抗体 ...

6楼2012-08-29 20:04:32
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xfn106

金虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by 释梦110 at 2012-08-29 20:03:30
我们做的双抗原夹心法中，有的产品中标记的和检测线上的抗原是同一种，血清中抗体经过金标垫时，形成抗原抗体复合物，然后复合物与检测线上的抗原结合，显色。双抗体夹心法也可以吧！目前还是初学者，多多指教，这 ...

谢谢你，我也是刚开始操作，我想我用双抗夹心法的道理应该和你双抗原是一样的，主要是之前有用同一种多抗试过两次，只有质控线显色，所以也在纠结中啊
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7楼2012-08-30 08:41:13
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nsp27

木虫 (知名作家)

过黄河，趟长江，走遍神州大地

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by xfn106 at 2012-08-30 08:41:13
谢谢你，我也是刚开始操作，我想我用双抗夹心法的道理应该和你双抗原是一样的，主要是之前有用同一种多抗试过两次，只有质控线显色，所以也在纠结中啊...

双抗的，质控线可以用二抗。比如说你一抗用的兔源抗体，那么二抗可以用羊抗兔IgG  

如果一抗用鼠源的，二抗可以用羊抗鼠的IgG

这个二抗的价格很便宜的，各种各样的都有。
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下关风，上关花，苍山雪，洱海月。过黄河，趟长江，走遍世界大地。
8楼2012-12-24 13:35:37
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xfn106

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by nsp27 at 2012-12-24 13:35:37
双抗的，质控线可以用二抗。比如说你一抗用的兔源抗体，那么二抗可以用羊抗兔IgG  

如果一抗用鼠源的，二抗可以用羊抗鼠的IgG

这个二抗的价格很便宜的，各种各样的都有。...

质控线我知道，我是纠结金标垫和检测线上的抗体是不是一模一样的抗体，若不同，不同在哪里这个问题？而且我的是多抗，不是单抗
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9楼2012-12-25 10:05:30
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小太阳_shine

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by nsp27 at 2012-12-24 13:35:37
双抗的，质控线可以用二抗。比如说你一抗用的兔源抗体，那么二抗可以用羊抗兔IgG  

如果一抗用鼠源的，二抗可以用羊抗鼠的IgG

这个二抗的价格很便宜的，各种各样的都有。...

您好，我想请问一下，我也用双抗体夹心法，NC上质控线和检测线的抗体必须是同种属来源么，一抗用鼠抗，二抗必须用羊抗鼠么，用兔抗鼠可以么，，，，，，多谢了亲。。
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10楼2013-03-16 11:04:32
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