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guanjinke

银虫 (小有名气)

[求助] PCR求助

PCR扩出的条带不亮，后切胶回收进行二次扩增，为什么片段会减少啊？
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1楼 2012-07-15 14:16:43
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necilyx

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
guanjinke: 金币+5 2012-07-15 18:58:44
如果二次扩增目的条带很弱很弱的话，建议还是重新优化一下条件吧，一般老说，扩增条带有目的条带但是不是很亮经过胶回收再扩增的话目的条带会亮很多的~
赞一下 回复此楼
聪明才智要为意外做准备~~
2楼2012-07-15 18:10:41
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84146922

金虫 (小有名气)
guanjinke: 回帖置顶 2012-07-17 16:06:23
二次扩增的效率比较低，引物结合没有一次扩增好，建议进行温度梯度PCR，减少模板量。
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3楼2012-07-16 08:38:24
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