| 查看: 1912 | 回复: 13 | |||
| 本帖产生 1 个 BioEPI ，点击这里进行查看 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[求助]
求助，RNA提取方法 已有1人参与
|
|||
|
矮牵牛总RNA叶片的提取方法，谁有，可以介绍一下吗？ 电泳的时候用非变性胶。 总是提不出来，我用的是传统的trizal方法 [ Last edited by peijiawai on 2012-7-14 at 06:48 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
290调剂生物0860
已经有32人回复
-
271求调剂
已经有28人回复
-
105500药学求调剂
已经有4人回复
-
274求调剂
已经有10人回复
-
335求调剂
已经有20人回复
-
化工学硕294分，求导师收留
已经有33人回复
-
290求调剂
已经有22人回复
-
291 求调剂
已经有36人回复
-
食品与营养（0955）271求调剂
已经有16人回复
-
22408 312求调剂
已经有10人回复
淘气维尼89
木虫 (小有名气)
- 应助: 9 (幼儿园)
- 金币: 2193.1
- 帖子: 129
- 在线: 125.1小时
- 虫号: 1764336
- 注册: 2012-04-18
- 性别: GG
- 专业: 抗体工程学
【答案】应助回帖
★ ★
silicare: 金币+2, 谢谢参与 2012-07-19 09:16:00
silicare: 金币+2, 谢谢参与 2012-07-19 09:16:00
|
⑴ 称取一定量的植物组织放入研磨中，液氮研磨成粉，加入适量的异硫氰酸胍提取缓冲液(w/v约为1:10)，充分研磨。 ⑵ 将研磨液转入EP管中，加入十分之一体积2 mol/L的醋酸钠溶液(pH = 4.8)，混匀后加入等体积的氯仿(氯仿可适量减少)，盖紧EP管后剧烈摇动5 min，再冰上静止5 min，4 ℃离心15 min(12000 r/min)。 ⑶ 离心后取上清至新的EP管中，加入等体积的氯仿重复抽提一次。如果中间有蛋白层，继续抽提直至无蛋白层为止。 ⑷ 取上清，加入1/3体积的 5mol/L的醋酸钾溶液，混匀后冰浴15 min，4℃离心15min(12000 r/min)。 ⑸ 取上清，加入等体积的异丙醇和十分之一体积的3 mol/L醋酸钠溶液(－20 ℃冻存)，缓慢摇匀后在－20 ℃冰箱中沉淀30 min，4℃ 离心15min(12000 r/min)，使RNA沉淀在管壁。 ⑹ RNA沉淀用75%的酒精清洗两次后风干，用适量的DEPC水溶解。凝胶电泳检测其完整性。(1.2%的琼脂糖凝胶电泳检测，电压：110 V出孔，90 V跑胶) |
12楼2012-07-16 23:54:29
sesame_oil
荣誉版主 (文坛精英)
- 应助: 4518 (副教授)
- 贵宾: 2.947
- 金币: 35328.4
- 散金: 385
- 红花: 188
- 沙发: 2
- 帖子: 18585
- 在线: 536.5小时
- 虫号: 1188734
- 注册: 2011-01-12
- 专业: 计算机应用技术
- 管辖: 论文投稿
2楼2012-07-14 23:12:03
zhuhaoyong30649
木虫 (著名写手)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 1841.1
- 散金: 246
- 红花: 1
- 帖子: 1802
- 在线: 111.8小时
- 虫号: 460555
- 注册: 2007-11-16
- 专业: 水产生物营养与饲料学
3楼2012-07-15 07:56:51
4楼2012-07-15 08:55:34
