24小时热门版块排行榜    

查看: 1841  |  回复: 13
本帖产生 1 个 BioEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

peijiawai

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助,RNA提取方法 已有1人参与

矮牵牛总RNA叶片的提取方法,谁有,可以介绍一下吗?
电泳的时候用非变性胶。
总是提不出来,我用的是传统的trizal方法

[ Last edited by peijiawai on 2012-7-14 at 06:48 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

c19345174

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
准备工作:去RNA酶的研钵、枪头、EP管!
步骤:
1、取待提取组织,快速称重,放入加有液氮的研钵中,充分研磨。
2、液氮挥干后根据组织重量加入TRIZOL(1ml/500mg),融化后分装至去RNA酶EP管中,震荡摇匀2min左右充分裂解后10000转左右离心10min。取上清。
3、上清加入氯仿或氯仿:异戊醇等蛋白变性剂,量为每mlTRIZOL加入200ul氯仿。震荡摇匀30S后10000转离心10min。取上清层,切勿吸到中间层。
4、重复步骤3若干次至中间层几乎没有(次数越多,相对而言对tRNA影响越大,如纯度、浓度)
5、上清加入异丙醇(1:1)沉淀2h。离心留沉淀。即为tRNA!DEPC水溶测浓度及纯度。大体积乙醇或异丙醇封好后液氮保存1个月以上没有问题。
说明:根据不同组织RNA差异提取差异不同,对于多糖、多酚及蛋白的去除在相应步骤中加入相应试剂!
11楼2012-07-16 20:05:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

sesame_oil

荣誉版主 (文坛精英)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不是哥不笑,一笑粉就掉
2楼2012-07-14 23:12:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuhaoyong30649

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
TRIzol法,样品要研磨充分,不要贪多!其他的都知道的了!祝你成功!
3楼2012-07-15 07:56:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

peijiawai

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zhuhaoyong30649 at 2012-07-15 07:56:51
TRIzol法,样品要研磨充分,不要贪多!其他的都知道的了!祝你成功!

谢谢,但是提了一共8次,全部都是降解的,没有可用的RNA
4楼2012-07-15 08:55:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂材料学硕080500,总分289分 5+3 @taotao 2026-03-19 20/1000 2026-03-23 09:48 by 洛阳laow
[考研] 石河子大学(211、双一流)硕博研究生长期招生公告 +3 李子目 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:01 by 怎么释怀
[考研] 一志愿华中科技大学071000,求调剂 +4 沿岸有贝壳6 2026-03-21 4/200 2026-03-22 07:21 by ilovexiaobin
[考研] 资源与环境 调剂申请(333分) +5 holy J 2026-03-21 5/250 2026-03-21 22:42 by Catalysis25
[考研] 求调剂 +4 要好好无聊 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:57 by 学员8dgXkO
[考研] 0703化学调剂 +4 妮妮ninicgb 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:39 by 学员8dgXkO
[考研] 297求调剂 +11 戏精丹丹丹 2026-03-17 12/600 2026-03-21 17:47 by ColorlessPI
[考研] 0805材料320求调剂 +3 深海物语 2026-03-20 3/150 2026-03-21 15:46 by 无际的草原
[考研] 机械专硕299求调剂至材料 +3 kkcoco25 2026-03-16 4/200 2026-03-21 03:52 by JourneyLucky
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业(081702)315分求调剂 +12 yangfz 2026-03-17 12/600 2026-03-21 03:30 by JourneyLucky
[考研] 083200学硕321分一志愿暨南大学求调剂 +3 innocenceF 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:35 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南京理工大学085701资源与环境302分求调剂 +4 葵梓卫队 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:02 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工 322求调剂 +4 然11 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:12 by luoyongfeng
[考研] 一志愿 南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕 +5 @taotao 2026-03-20 5/250 2026-03-20 20:16 by JourneyLucky
[考研] 261求B区调剂,科研经历丰富 +3 牛奶很忙 2026-03-20 4/200 2026-03-20 19:34 by JourneyLucky
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +7 困于星晨 2026-03-17 9/450 2026-03-20 17:38 by 无懈可击111
[考研] 【同济软件】软件(085405)考研求调剂 +3 2026eternal 2026-03-18 3/150 2026-03-18 19:09 by 搏击518
[考研] 收复试调剂生 +4 雨后秋荷 2026-03-18 4/200 2026-03-18 14:16 by elevennnne
[考研] 277调剂 +5 自由煎饼果子 2026-03-16 6/300 2026-03-17 19:26 by 李leezz
[考研] 070300化学学硕求调剂 +6 太想进步了0608 2026-03-16 6/300 2026-03-16 16:13 by kykm678
信息提示
请填处理意见