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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请教PCR产物酶切后是否可以直接过柱纯化而不胶回收？
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Ljyshmily

木虫 (正式写手)

金龟子

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-07-13 16:09:26
liuyu_sdili: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢交流 2012-07-13 17:54:21
那要看你的纯化试剂盒能不能直接纯化，一般pcr产物先电泳，没有跑出条带的就扔了，对效果不好的再进行纯化，我用索莱宝的试剂盒就可以对pcr混合液进行纯化，天根的有一款dna纯化和胶回收两用的试剂盒也可以直接纯化混合液。
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有奋斗有人生
11楼2012-07-13 10:23:04
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王家大成

木虫 (正式写手)

囧囧小虫
只要切下来的非目的片段很短，就可以，没有问题，我一直这样做
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一念起，万水千山；一念灭，沧海桑田！
12楼2012-07-19 10:21:33
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84146922

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
liuyu_sdili: 金币+3, ★有帮助 2012-07-20 14:40:12
如火切下来的片段小，应该木有问题，如果切下来的片段，建议最好使用胶回收，要不连接效率会低。
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13楼2012-07-20 12:02:05
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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-07-20 13:50:53
看你的目的是什么把。
如果是用载体做克隆测序，酶切后的DNA SIZE 差异比较大是可以的。但是后续你需要挑的克隆及其PCR检测工作量比回收工作量大哈
如果自己有测序仪，像你说的这种直接纯化测序是绝对不可以的。
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14楼2012-07-20 12:20:00
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cynthia8225

新虫 (小有名气)
觉得可以是可以，但是最好还是跑胶安全点。。。还有就是要是你真的用试剂盒还不如直接乙醇沉淀好了。。。
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15楼2012-07-25 14:44:37
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943475488

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
15楼: Originally posted by cynthia8225 at 2012-07-25 14:44:37
觉得可以是可以，但是最好还是跑胶安全点。。。还有就是要是你真的用试剂盒还不如直接乙醇沉淀好了。。。

你好，我做完酶切PCR产物后，现在回收产物有好几个方法，现在只有乙醇沉淀的方法回收率最高，但我想问醇沉最后不会把酶切点切开的部分沉淀下来吗，如果沉下来，对后面连接是会有影响的吧
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16楼2016-01-15 23:05:02
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