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gbtgwm

新虫 (初入文坛)

[求助] 大鼠DRG培养出来的细胞,大家帮我看看是什么细胞啊??? 已有1人参与

DRG培养神经元,Ara-C连续杀3d后,还是有这些细胞,大家帮我看看都是什么细胞啊???



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chenxh3344

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

前辈,我是用的neurobasal-A+B27(1:50)+(40ng/ml)β-NGF+L-Glutamine(0.5mmol/l)培养基培养,可三天了,没见到什么细胞,不知道哪里出错了,请前辈帮我看看。
1.在体式显微镜下取下DRG放入冰的PBS液里面
2.将其用PBS洗涤三次,再用眼科剪剪碎
3.剪碎后移入15ml离心管中,加入0.25%的胰酶和0.2%的IV型胶原酶,37°C孵育30min,并吹打两次
4.加入冰的PBS终止反应,离心 1000rpmX5min ,弃上清
5.加入上述培养基重悬细胞,铺入PLL包被的25mm2的培养瓶
6.培养3天了 没有见到什么梭形或者三角形的神经元
请前辈指导啊,抓狂
7楼2014-08-17 21:06:19
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废哥117

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
silicare: 金币+3, BioEPI+1, 应助指数+1, 有成纤维吗 2012-07-11 09:18:54
yqbter: 金币+2, 鼓励发帖! 2012-07-11 10:18:13
看起来有雪旺细胞还有成纤维细胞,Ara-C的功能是杀死增殖的细胞,但效果并不是说杀了就一定没有,神经元本身也分泌一些物质促进周围细胞的生长,你的DRG用什么培养基养的?
不断提高自己
2楼2012-07-11 09:14:51
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gbtgwm

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 废哥117 at 2012-07-11 09:14:51
看起来有雪旺细胞还有成纤维细胞,Ara-C的功能是杀死增殖的细胞,但效果并不是说杀了就一定没有,神经元本身也分泌一些物质促进周围细胞的生长,你的DRG用什么培养基养的?

用的neurobasal+B27+glutamine+Ara-C+NGF
3楼2012-07-14 00:53:50
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废哥117

银虫 (小有名气)

Ara-C的纯化效果不是很理想,你可以试试其他的灭杀增殖细胞的试剂
不断提高自己
4楼2012-07-14 14:16:04
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