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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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nieyaru

新虫 (小有名气)

[交流] WB转膜问题 已有4人参与

我刚做WB,是大鼠发肝组织。电泳完感觉不错,转膜看膜上mark也挺清楚的,一抗是1:1000,二抗1:5000;但是曝光时候看到整个膜都是亮的,根本看不到条带,于是转完膜后用丽春红染了一下色,也染了胶,看了一下抹上条带感觉有点集中,分不清哪个是目的条带,胶上也觉得没转干净,做了好多次都是这样,发图大家给分析下是什么原因,有么有可能是我的蛋白不行啊 ?还是我的抗体浓度有问题



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hayaku

铜虫 (初入文坛)


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染一下膜再看,是否有清楚的条带,否则有可能蛋白降解了,也有可能离子浓度不正确,导致蛋白分离不好。
4楼2012-12-20 21:14:51
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houyuning

铜虫 (初入文坛)

★ ★
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缩++影: 金币+1, 欢迎到医学版块交流 2012-12-20 12:42:53
多少电压,转了多长时间,用的NC还是PVDF?
2楼2012-12-18 13:32:03
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ujsyangyong

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
缩++影: 金币+1, 欢迎到医学版块交流 2012-12-20 12:42:59
增加转膜后用什么封闭的?BSA还是脱脂牛奶?适当增加封闭时间,提高一抗浓度,降低二抗浓度试试。祝成功。
实验,实验,还是实验!
3楼2012-12-20 02:12:06
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xiaofeiyu1

银虫 (正式写手)


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根据不同的目的条带分子量选择合适浓度的胶,封闭时间可以长一些,降低二抗浓度
不可再虚度时光!!
5楼2013-01-17 10:22:13
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