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yangjianchen

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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小丹木木: 金币+3, 分析的很全面哦 2012-07-09 13:44:16
1、照相曝光的问题、
2、胶本身不干净
3、可能确实存在非特异扩增的东西,我以前用cDNA扩增确实出现过这种现象,因为cDNA是大小不一的东西,当然DNA也有可能这样提高下退火试试
11楼2012-07-09 11:10:45
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hyy229

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
模板浓度太高了吧?稀释一下 做个梯度看看 先少做几个样好了
12楼2012-07-10 10:05:36
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hzlatqh

银虫 (小有名气)

孔里有很多亮斑呢,感觉像是大分子,诸如蛋白或者基因组,不知道LZ的模版是DNA片段还是菌一类的东西,要是后者的话,有可能就是模版太多干扰了。为啥要用4%的胶?目标条带是多大?
两个黄鹂鸣翠柳,一行白鹭上青天
13楼2012-07-10 16:30:56
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shixiaba

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不是拔出梳子的时候把点样的小口弄坏了导致的吧?
14楼2012-07-10 16:36:34
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Arrennew

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
跑胶前加的染料,杂质多时就是这样,跑完泡染就好了。
生命不息,探索不止。
15楼2012-07-10 18:37:43
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mdtdtao

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是不是胶还没完全凝固你就开始跑了?制完胶要等上半个小时的
喜欢一切美好的东西
16楼2012-07-11 14:10:01
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chicharito

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-07-12 13:51:03
1、pcr引物设计有问题,建议重新设计。
2、pcr退火温度低,提高温度试试。
跟模板浓度关系不大吧,我师妹出现过这个情况,是引物的问题。
姿态----
17楼2012-07-11 15:22:07
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84146922

金虫 (小有名气)

之前我也出现过类似情况,我减低模板浓度,减少电压到90V,情况有所改善,希望对你有帮助
18楼2012-07-12 09:20:49
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luwenyi

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
18楼: Originally posted by 84146922 at 2012-07-12 09:20:49
之前我也出现过类似情况,我减低模板浓度,减少电压到90V,情况有所改善,希望对你有帮助

我后来重新配了缓冲液就好了,可能以前配的缓冲液太久了
19楼2012-07-13 10:52:29
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luwenyi

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
17楼: Originally posted by chicharito at 2012-07-11 15:22:07
1、pcr引物设计有问题,建议重新设计。
2、pcr退火温度低,提高温度试试。
跟模板浓度关系不大吧,我师妹出现过这个情况,是引物的问题。

我后来用了TBE的缓冲液,这种现象就没有了
20楼2012-07-13 10:53:08
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