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xmckyltwx

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
模板量太大,还有就是模板浓度太高~~
成功的起点是坚信,成功的终点是坚持~~
11楼2012-07-10 21:24:21
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zhenlisha

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
10楼: Originally posted by 690733791 at 2012-07-10 10:56:40
体系:ddH2O 29.8μL; 10*PCRbuffer 5μL;(2.5μM)dNTP 8.0μL;(10μM)上下引物各1μL;taq(5μ/μL)0.5μL;模板 2μL
程序:94℃ 2min,30cycles(98℃,10s;50℃,30s;72℃,50s for ITS / 1min 50s for 18S),7 ...

我原来侧过ITS,体系dNTP 5uL,模版3uL;程序95℃ 5min,40循环(95℃30s,55℃ 30s,72℃ 1min),72℃ 10min,4℃ store
还有我是手提的,没用过试剂盒,最后DNA析出可以明显看到,lz先改下程序试试吧
12楼2012-07-11 09:07:33
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