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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 滚环扩增技术
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姜红馨520

铜虫 (初入文坛)

[求助] 滚环扩增技术

各位大侠，谁在做滚环扩增啊，俺是新手，想请问是怎么做的，需要注意什么
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1楼 2012-07-04 15:07:38
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剪爱简爱1120

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bioxiaoqiang at 2012-07-05 04:23:17
RCA文章有很多，首先你要确定是否有环产生？用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳可以check，确定有环产生了，在进行下面的实验。

我用20%的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测不出我的环（49nt）,用的是SYBR Green 1染料，是不是染料用错了呢？谢谢
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4楼2013-11-19 16:31:05
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bioxiaoqiang

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
看天: 金币+3, 鼓励回答 2012-07-05 13:50:51
RCA文章有很多，首先你要确定是否有环产生？用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳可以check，确定有环产生了，在进行下面的实验。
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2楼2012-07-05 04:23:17
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姜红馨520

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bioxiaoqiang at 2012-07-05 04:23:17
RCA文章有很多，首先你要确定是否有环产生？用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳可以check，确定有环产生了，在进行下面的实验。

谢谢
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3楼2012-07-10 09:36:38
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bioxiaoqiang

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 剪爱简爱1120 at 2013-11-19 16:31:05
我用20%的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测不出我的环（49nt）,用的是SYBR Green 1染料，是不是染料用错了呢？谢谢...

按照原理SYBR Green 1 是不行的，因为需要形成双链才能让染料嵌进小沟。用 silver stain。
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5楼2013-11-20 15:25:41
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