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姜红馨520

铜虫 (初入文坛)

[求助] 滚环扩增技术

各位大侠,谁在做滚环扩增啊,俺是新手,想请问是怎么做的,需要注意什么
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bioxiaoqiang

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
看天: 金币+3, 鼓励回答 2012-07-05 13:50:51
RCA文章有很多,首先你要确定是否有环产生?用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳可以check,确定有环产生了,在进行下面的实验。
2楼2012-07-05 04:23:17
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姜红馨520

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bioxiaoqiang at 2012-07-05 04:23:17
RCA文章有很多,首先你要确定是否有环产生?用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳可以check,确定有环产生了,在进行下面的实验。

谢谢
3楼2012-07-10 09:36:38
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剪爱简爱1120

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bioxiaoqiang at 2012-07-05 04:23:17
RCA文章有很多,首先你要确定是否有环产生?用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳可以check,确定有环产生了,在进行下面的实验。

我用20%的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测不出我的环(49nt),用的是SYBR Green 1染料,是不是染料用错了呢?谢谢
4楼2013-11-19 16:31:05
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bioxiaoqiang

金虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 剪爱简爱1120 at 2013-11-19 16:31:05
我用20%的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测不出我的环(49nt),用的是SYBR Green 1染料,是不是染料用错了呢?谢谢...

按照原理SYBR Green 1 是不行的,因为需要形成双链才能让染料嵌进小沟。用 silver stain。
5楼2013-11-20 15:25:41
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