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Lynn和Mia

金虫 (小有名气)
好贴马克之~~~正解我所问
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11楼2012-07-04 22:24:13
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wcg129

禁虫 (著名写手)
本帖内容被屏蔽
12楼2012-07-05 09:58:04
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czcpudai

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by wqj1988926 at 2012-07-04 16:00:13
用自己的反转录的模版，梯度稀释，做一个类似的标准曲线，来确证扩增效率，因为这个扩增效率也只是在一定的浓度范围内是1，但其实大部分的情况下我们反转录的模版的浓度时符合的。
一般采用的方法是2-delta-delta ...

要是使用自己反转录的模板，需不需要知道模板的浓度？？？ 还是取一定量的模板，做梯度稀释，然后做标准曲线？？？
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13楼2012-07-09 11:12:30
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wqj1988926

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

取一定量的模板，做梯度稀释，然后做标准曲线,这个标准曲线只是为了确保使你的模版浓度在这个浓度范围内，扩增效率是1左右，并不是用来定量的
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风雪夜归人
14楼2012-07-09 12:54:05
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czcpudai

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by wqj1988926 at 2012-07-09 12:54:05
取一定量的模板，做梯度稀释，然后做标准曲线,这个标准曲线只是为了确保使你的模版浓度在这个浓度范围内，扩增效率是1左右，并不是用来定量的

恩  明白了  多谢！
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15楼2012-07-09 13:18:54
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czcpudai

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by wqj1988926 at 2012-07-09 12:54:05
取一定量的模板，做梯度稀释，然后做标准曲线,这个标准曲线只是为了确保使你的模版浓度在这个浓度范围内，扩增效率是1左右，并不是用来定量的

您好，我还有一个问题想问一下您，就是关于实验对照问题。
对于阳性对照，指的是含目的基因模板的实验组吧？
阴性对照就是不含目的基因的模板的实验组吧？ 这两个验证的目的是什么？ 阴性对照验证体系有没有污染？阳性对照验证模板的质量，还是反应体系的准确性？？？
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16楼2012-07-09 13:34:16
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wqj1988926

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

关于对照的问题，一般做的时候只做NTC，即以dd水代替模版，应该就是你说的阴性对照吧
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风雪夜归人
17楼2012-07-09 15:36:40
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孙启亮

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

当你对某个基因进行绝对定量的时候，需要做标准曲线；当做相对定量的时候，不需要做标准曲线。
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18楼2012-07-09 22:29:01
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czcpudai

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
18楼: Originally posted by 孙启亮 at 2012-07-09 22:29:01
当你对某个基因进行绝对定量的时候，需要做标准曲线；当做相对定量的时候，不需要做标准曲线。

恩  好的 谢谢了
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19楼2012-07-10 12:48:49
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fengyunqb

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

求助，我想克隆一个新基因，这个基因在NCBI里面的序列有预测字样，我该怎么做，谢谢解惑。
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20楼2012-07-10 14:47:40
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