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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 抑菌试验总是没有效果
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敏贤豆豆

新虫 (小有名气)

[求助] 抑菌试验总是没有效果

我是化学专业的，现在在做一个提取物的抑菌实验，根据之前师兄师姐做的实验可以肯定这个东西是有抑菌效果的，但是我自己做的时候完全没有一点效果。而且还挺多问题的，由于我是这方面的菜鸟，希望各位大侠能详细点给我讲讲，谢啦~
首先，我那个提取物是用70%的乙醇提取的，用琼脂平板对大肠杆菌和金黄葡萄杆菌做抑菌试验，加入100μL的细菌（培养了24h）推平后，放入牛津杯，加入0.05g/mL的提取物100μL，37摄氏度下培养24h，期间10h看了一次，发现我的提取物都挥发完了，但是细菌基本上没怎么长啊(不知道是细菌没开始长还是被抑制了没长），后来24h后看了一次，发现细菌没长（有些长了一点点），但是没有抑菌圈。再过了一天，发现细菌长满了。不知道怎么回事？是抑菌效果太好了吗？还是都挥发完了啊？如果是都挥发完了，那有什么方法可以防止挥发呢？是不是一般会挥发的都测不了抑菌圈的啊？求解啊！！！

[ Last edited by 敏贤豆豆 on 2012-7-4 at 09:24 ]
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1楼 2012-07-04 09:22:33
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lgs1

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
敏贤豆豆: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢 2012-07-16 18:31:25
用乙醇提取后是直接溶在乙醇里面就加到牛津杯里面了吗？如果是这样那很容易就挥发完了，我觉得如果能溶于水的话最好还是用水做溶剂，而且牛津杯里面一般的加药量是200μL，倒平板的话应该是倒两层吧，细菌要和上层琼脂混匀，不是用推棒推的，这样不均匀，加完药以后最好先放到4℃让药扩散一下，再放37℃，具体情况你可以去下一些技术操作看一下
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2楼2012-07-04 12:28:35
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weizheng104

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
在做抑菌平板时，最好把指示菌活化一下，培养到对数期时，将其菌液与培养基混合，再倒平板。注意培养基温度，不要把菌烫死。根据你说的 应该是指示菌的问题，不是样品问题。
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3楼2012-07-05 09:49:34
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