24小时热门版块排行榜    

查看: 3735  |  回复: 17

果子么么茶

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
加了百分之一的BSA 和Trition 效果可以
11楼2012-07-05 21:50:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cinsy

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼上正解,最近试了Fermentas的NotI快速内切酶,效果也很不错。
12楼2012-07-06 12:18:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tupac225

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-07-07 13:46:39
我也构建过Bamh I和 NotI 为酶切位点的质粒,taka的酶没有neb的好用,我都试过了,建议你用NEB的酶,过夜可以切开,另外注意质粒的纯度和浓度。
coasttocoast。
13楼2012-07-06 15:47:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tupac225

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

最好用NEB的not i酶,taka的不怎么好用,另外质粒的纯度和浓度要好,
coasttocoast。
14楼2012-07-06 15:52:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aofeng860308

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

是能切开的,没有问题!我一向都是切两个小时就好了的,切的时候要加BSA的,这个有没有注意?
15楼2012-07-06 21:54:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陈年芬芳

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流经验 2012-07-07 13:46:55
如果是重组质粒,可能最初扩增就有问题。另外关于酶切效率,个人认为应适当扩大酶切体系(特别是Takara的),单纯增加酶量不太合适。如果条件允许,建议使用NEB的内切酶,就是贵一些,但是速度效率好,检测酶切半小时就好,用于后续试验要回收的一般酶切一个半小时或两小时都足够了。
16楼2012-07-07 13:15:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

钟mjzzzzzz

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
13楼: Originally posted by tupac225 at 2012-07-06 15:47:25
我也构建过Bamh I和 NotI 为酶切位点的质粒,taka的酶没有neb的好用,我都试过了,建议你用NEB的酶,过夜可以切开,另外注意质粒的纯度和浓度。

您好,请问您这两个酶双切体系是如何?切多久?
17楼2016-10-30 22:53:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sailor521

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
15楼: Originally posted by aofeng860308 at 2012-07-06 21:54:14
是能切开的,没有问题!我一向都是切两个小时就好了的,切的时候要加BSA的,这个有没有注意?

01%BSA加多少?

发自小木虫Android客户端
别太放肆,没什么用!
18楼2017-01-06 20:31:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Marado 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703化学调剂 ,六级已过,有科研经历 +4 曦熙兮 2026-03-15 4/200 2026-03-15 18:01 by JourneyLucky
[考研] 321求调剂 +3 大米饭! 2026-03-15 3/150 2026-03-15 17:48 by 哈哈哈哈嘿嘿嘿
[考研] 26考研一志愿中国石油大学(华东)305分求调剂 +3 嘉年新程 2026-03-15 3/150 2026-03-15 13:58 by 哈哈哈哈嘿嘿嘿
[考研] 311求调剂 +3 26研0 2026-03-15 3/150 2026-03-15 09:12 by JourneyLucky
[考研] 289求调剂 +5 步川酷紫123 2026-03-11 5/250 2026-03-15 00:45 by kruisytel
[考研] 283求调剂 +6 小楼。 2026-03-12 9/450 2026-03-14 22:15 by cfxczx2015
[考研] 材料工程327求调剂 +3 xiaohe12w 2026-03-11 3/150 2026-03-14 20:20 by ms629
[考研] 288求调剂 +14 王晓阳- 2026-03-09 19/950 2026-03-14 02:05 by JourneyLucky
[考研] 332分材料工程调剂 +3 莓好时光海苔 2026-03-09 3/150 2026-03-14 02:03 by JourneyLucky
[考研] 一志愿天津大学,英一数二305分求调剂,四六级已过 +8 小小番的茄 2026-03-09 8/400 2026-03-14 01:53 by JourneyLucky
[考研] 306求调剂 +4 唐薏薏 2026-03-09 4/200 2026-03-14 01:19 by JourneyLucky
[考研] 327求调剂 +4 Ffff03 2026-03-10 4/200 2026-03-14 00:17 by JourneyLucky
[考研] 279求调剂 +3 Dizzy123@ 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:02 by JourneyLucky
[考研] 材料工程调剂 +4 咪咪空空 2026-03-11 4/200 2026-03-13 19:57 by JourneyLucky
[考研] 310求调剂 +3 【上上签】 2026-03-11 3/150 2026-03-13 16:16 by JourneyLucky
[考研] 化工学硕306求调剂 +9 42838695 2026-03-12 9/450 2026-03-13 10:16 by houyaoxu
[考研] 321求调剂(食品/专硕) +3 xc321 2026-03-12 6/300 2026-03-13 08:45 by xc321
[考研] 341求调剂 +4 捣蛋猪猪 2026-03-11 4/200 2026-03-12 14:47 by ruiyingmiao
[考研] 294 英二数二物化 求调剂 +6 米饭团不好吃 2026-03-09 6/300 2026-03-09 23:55 by barlinike
[考研] 一志愿山东大学,总分327,英语二79,有论文,有竞赛,已过四六级 +3 木木目目1 2026-03-09 3/150 2026-03-09 19:52 by yuningshan
信息提示
请填处理意见