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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 一般的实验室能做原生质体融合吗?
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小小亚杰

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

没有太多要求，主要是做实验的人仔细认真就好。
做过链霉菌的，还好，不是很难
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21楼2012-07-05 22:50:49
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chibang1220

木虫 (著名写手)
引用回帖:
21楼: Originally posted by 小小亚杰 at 2012-07-05 22:50:49
没有太多要求，主要是做实验的人仔细认真就好。
做过链霉菌的，还好，不是很难

40倍显微镜下能看清楚原生质体吗？国产溶菌酶好用么？不知道为什么我说的原生质体制备率不高。显微镜下看不出来，我的菌是0.3微米左右的
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人的差别在于业余时间
22楼2012-07-06 10:30:42
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小小亚杰

木虫 (正式写手)
引用回帖:
22楼: Originally posted by chibang1220 at 2012-07-06 10:30:42
40倍显微镜下能看清楚原生质体吗？国产溶菌酶好用么？不知道为什么我说的原生质体制备率不高。显微镜下看不出来，我的菌是0.3微米左右的...

国产溶菌酶没问题，不要处理过头了。
我都没用过显微镜看，长出克隆就行了额。
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23楼2012-07-07 19:28:28
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chibang1220

木虫 (著名写手)
引用回帖:
23楼: Originally posted by 小小亚杰 at 2012-07-07 19:28:28
国产溶菌酶没问题，不要处理过头了。
我都没用过显微镜看，长出克隆就行了额。...

不用显微镜，假阳性岂不是很多？
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人的差别在于业余时间
24楼2012-07-08 19:03:30
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念心海100523

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
13楼: Originally posted by chibang1220 at 2012-07-04 20:33:41
我是吧2个高产菌进行融合，是他们的基因组进行交换，产生更高的菌株。叫做基因组改组。但我们实验室都是做基因的，觉得这个方法不太好，因为没人做...

你们实验室都做到基因了，你为什么还要做基因组的？直接找到基因进行改造啊
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25楼2012-12-19 14:30:20
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念心海100523

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
15楼: Originally posted by 环境因子 at 2012-07-04 22:01:00
我当时也做这个的，还可以的，第一篇文献是在02年出来的，还是nature的。别人还做了个对比，好像是传统技术的1000倍还是多少倍来着。...

你好，我最近在做这个，但是我想知道如何确定是不是融合子？如果我对这个菌体的一些抗性及其他普通性质都不是很了解能筛选出融合子吗？谢谢
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26楼2012-12-19 14:32:03
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念心海100523

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
22楼: Originally posted by chibang1220 at 2012-07-06 10:30:42
40倍显微镜下能看清楚原生质体吗？国产溶菌酶好用么？不知道为什么我说的原生质体制备率不高。显微镜下看不出来，我的菌是0.3微米左右的...

我用的40倍倒置显微镜，可以拍照，还可以，但是制备率我都是通过平板计数算了，国产的溶菌酶还可以的，但是实验操作要小心仔细
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27楼2012-12-19 14:33:58
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环境因子

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
26楼: Originally posted by 念心海100523 at 2012-12-19 14:32:03
你好，我最近在做这个，但是我想知道如何确定是不是融合子？如果我对这个菌体的一些抗性及其他普通性质都不是很了解能筛选出融合子吗？谢谢...

我是用双亲灭活的方式筛选的，每个用不同的方式灭活后融合，只有二者互补才能在培养基上长出来，你可以查查双亲灭火筛选的论文看看。
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奋斗
28楼2012-12-20 14:22:57
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chibang1220

木虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 环境因子 at 2012-07-02 21:09:06
这个还算好做，我做过原核的，没做过真核的，不过差别不算大，主要是在酶及酶处理的条件上。

能分享一下么？你的高渗溶液怎么配的啊？我也做原核，你的是什么菌 啊？
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人的差别在于业余时间
29楼2012-12-22 21:28:37
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