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lvbolantao

木虫 (著名写手)

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9楼: Originally posted by xiaoqing518 at 2012-07-03 11:09:54
一般微生物实验室都可以做的
需要酶和缓冲液
还有一些必备的检测仪器,如显微镜等
首先确定原生质体的制备条件
然后优化融合条件
最重要的一点是融合之后能不能得到你想要的菌种
任何育种的目的都是得到想要的 ...

你好,麻烦请教下,原生质体,用普通的显微镜可以观察到吗,书上说的相差,我看文献还能血球计数?我打算做的是链霉菌的,谢谢
活在当下
11楼2012-07-04 17:08:57
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chibang1220

木虫 (著名写手)

引用回帖:
11楼: Originally posted by lvbolantao at 2012-07-04 17:08:57
你好,麻烦请教下,原生质体,用普通的显微镜可以观察到吗,书上说的相差,我看文献还能血球计数?我打算做的是链霉菌的,谢谢...

40倍,可以的
人的差别在于业余时间
12楼2012-07-04 20:29:05
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chibang1220

木虫 (著名写手)

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8楼: Originally posted by 环境因子 at 2012-07-03 09:33:06
你是想做啥呢?一般细菌用溶菌酶处理,用高渗的缓冲液来稀释后涂布在高渗培养基上进行再生,不知道你的目的是什么所以不知道靠不靠谱....

我是吧2个高产菌进行融合,是他们的基因组进行交换,产生更高的菌株。叫做基因组改组。但我们实验室都是做基因的,觉得这个方法不太好,因为没人做
人的差别在于业余时间
13楼2012-07-04 20:33:41
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lvbolantao

木虫 (著名写手)

引用回帖:
12楼: Originally posted by chibang1220 at 2012-07-04 20:29:05
40倍,可以的...

谢谢
活在当下
14楼2012-07-04 20:51:52
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环境因子

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
13楼: Originally posted by chibang1220 at 2012-07-04 20:33:41
我是吧2个高产菌进行融合,是他们的基因组进行交换,产生更高的菌株。叫做基因组改组。但我们实验室都是做基因的,觉得这个方法不太好,因为没人做...

我当时也做这个的,还可以的,第一篇文献是在02年出来的,还是nature的。别人还做了个对比,好像是传统技术的1000倍还是多少倍来着。
奋斗
15楼2012-07-04 22:01:00
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chibang1220

木虫 (著名写手)

引用回帖:
15楼: Originally posted by 环境因子 at 2012-07-04 22:01:00
我当时也做这个的,还可以的,第一篇文献是在02年出来的,还是nature的。别人还做了个对比,好像是传统技术的1000倍还是多少倍来着。...

嗯,我下载到那片文献了,都看了。我觉得是很可行,但我们这是做基因的,大家感觉着个技术不熟悉,都不懂,没人能指导我,困难很多。你做这个成功了吗?
人的差别在于业余时间
16楼2012-07-05 10:48:13
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环境因子

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
16楼: Originally posted by chibang1220 at 2012-07-05 10:48:13
嗯,我下载到那片文献了,都看了。我觉得是很可行,但我们这是做基因的,大家感觉着个技术不熟悉,都不懂,没人能指导我,困难很多。你做这个成功了吗?...

成功了的,具体提高了多少倍我忘了,但是不是很高,因为那个菌不好,而且不是那种真正用于我所需要的用途。是本科做的。你得到原生质体融合前的那个突变库是怎么得到的啊?
奋斗
17楼2012-07-05 12:25:22
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chibang1220

木虫 (著名写手)

引用回帖:
17楼: Originally posted by 环境因子 at 2012-07-05 12:25:22
成功了的,具体提高了多少倍我忘了,但是不是很高,因为那个菌不好,而且不是那种真正用于我所需要的用途。是本科做的。你得到原生质体融合前的那个突变库是怎么得到的啊?...

紫外诱变得到的,
人的差别在于业余时间
18楼2012-07-05 18:12:48
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环境因子

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
18楼: Originally posted by chibang1220 at 2012-07-05 18:12:48
紫外诱变得到的,...

紫外诱变挺好的,这样提高了基因交换的频率,要提高很多倍,有篇很老的文献中有说过,举的例子好像是枯草芽孢杆菌的。你可以去找来看看。
奋斗
19楼2012-07-05 18:15:28
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chibang1220

木虫 (著名写手)

引用回帖:
19楼: Originally posted by 环境因子 at 2012-07-05 18:15:28
紫外诱变挺好的,这样提高了基因交换的频率,要提高很多倍,有篇很老的文献中有说过,举的例子好像是枯草芽孢杆菌的。你可以去找来看看。...

嗯,我看过好多了已经,但做起来。。。。
人的差别在于业余时间
20楼2012-07-05 21:43:57
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