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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » RNA 提取
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daidai77

铁虫 (初入文坛)

[求助] RNA 提取

急求：各位大虾，小女子第一次提取RNA ,不跑电泳只为测其浓度，由于样本量比较少，提取的过程中并未见到明显沉淀，而用紫外吸收法测定含量时，260nm附近有杂乱的峰值，A260/A280比值也在1.6几？这样是不是说明RNA 被提取出来了呢？但是不知道为什么测定的含量值远远大于它应有的含量，求助求助求助
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1楼 2012-07-01 13:04:41
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
260/280小于1.8，一般是由于存在蛋白污染，你可以下次提取时多做一步氯仿抽提，但抽提这个步骤很可能造成一部分RNA损失，所以最好加大初始提取量。
另外，可以检测260/230，有助于判断污染情况，这个比值一般应该在1以上，如果偏小，则可能是盐或者多糖之类的残留影响结果，需要用乙醇再清洗。
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植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
13楼2012-07-02 23:22:27
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
daidai77: 金币+1 2012-07-02 12:36:14
重新提吧，肯定是杂质很多。用于后续试验也是白浪费试剂。
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2楼2012-07-01 13:34:42
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daidai77

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by stone2239 at 2012-07-01 13:34:42
重新提吧，肯定是杂质很多。用于后续试验也是白浪费试剂。

我不做后续试验，只做到这一步，但是这个会是什么的影响呢？DNA？重新提过几次了，都是这个问题
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3楼2012-07-01 17:02:32
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l_h_10

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果只是想知道RNA被提取出来了没有，还是跑个电泳看一下吧。另外你的样品是植物还是动物？是用试剂盒提取的吗？
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4楼2012-07-01 21:35:58
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