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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请帮忙看看我用primer5设计的引物是否有问题？？
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l20065091

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 西瓜 at 2012-07-02 05:22:53
引物应该是没问题的。
你的产物才160bp，跟引物二聚体的位置会很接近，可能有条带但是你没看出来。建议你再做一次PCR，加个无模板的空白对照，两个产物放胶上一跑就很容易看了！
另外，由于产物很小，所以跑胶时间 ...

这个是电泳图片，DL2000Maker 右边是空白对照不加模板的，左边是每两个是一对引物扩增结果！

这个是电泳图片，DL2000Maker 右边是空白对照不加模板的，左边是每两个是一对引物扩增结果！
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11楼2012-07-04 10:10:44
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★ ★ ★
小丹木木: 金币+3, 辛苦了 2012-07-05 13:40:30
引用回帖:
11楼: Originally posted by l20065091 at 2012-07-04 10:10:44
这个是电泳图片，DL2000Maker 右边是空白对照不加模板的，左边是每两个是一对引物扩增结果！
c8/ed/1480413_1341367764_795.jpg
这个是电泳图片，DL2000Maker 右边是空白对照不加模板的，左边是每两个是一对引物扩 ...

“每两个是一对引物扩增结果”是什么意思……
看样子是没扩增出来。你的模板确定没问题吗？用其扩增其他片段OK吗？
以后这种100多bp的不用跑那么久的，不小心就跑出去了哈
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l20065091
12楼2012-07-04 15:37:02
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l20065091

新虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
12楼: Originally posted by 西瓜 at 2012-07-04 15:37:02
“每两个是一对引物扩增结果”是什么意思……
看样子是没扩增出来。你的模板确定没问题吗？用其扩增其他片段OK吗？
以后这种100多bp的不用跑那么久的，不小心就跑出去了哈...

好的，意思是每两个泳道是一样的，只是做了一个重复。还有我想知道，这种从数据库里找出的序列设计引物的话最终到PCR不会扩增出来的概率大不大？另外数据库中的序列也会有错误的哇？？
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13楼2012-07-05 09:23:19
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