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6%变性聚丙酰胺凝胶电泳SSR引物筛选 已有6人参与
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我是SSR引物筛选新手,有好多问题呀,请各位高手指点迷津~ (1)我是跑的六一厂24B型号,很小的那种垂直电泳槽,染色时胶要与玻璃板脱离,我做的是1mm的6%变性聚丙烯酰胺凝胶,在固定、染色、显色的过程中要转移凝胶,胶很容易就弄碎了,请问有什么好方法可以防止胶块碎裂啊? (2)我用的500ml的显色液,将两块胶一起染色,显色液中包括15g的Na2CO3,750ul的甲醛溶液和50ul的硫代硫酸钠,我是先将Na2CO3溶解在500ml的蒸馏水中,放入冰箱冷却,拿出来后再加入甲醛和硫代硫酸钠。在显色过程中显色不均是什么原因啊?就是条带有的出现的早有的出现的晚,最后导致有的染的特别深,有的染的特别浅。 (3)我用的方法都与之前师兄师姐跑的那种最大的玻璃板是一致的,只是因为胶更小,所以我用的试剂都按一定比例缩小了,就如上面的显色液的配方,缩小了1/4,这样做可行吗? 问题还有很多,急需各位帮助,谢谢啊! |
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