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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 如何抑制放线菌培养时污染的真菌？
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swallow1969

银虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by yc652090251 at 2012-06-25 15:51:09
培养基灭好后，倒板前待培养基不太烫的时候每100ml加入100μl（50mg/ml）放线菌酮。要是抑制细菌每100ml培养基加入200-400μl（10mg/ml）萘啶酮酸。

非常感谢！
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仰望星空脚踏实地
11楼2012-06-25 15:54:59
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swallow1969

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by swnz at 2012-06-25 15:44:12
以前做过稀有放线菌筛选有点经验。不外乎用抗生素、高温、贫瘠培养基等条件控制杂菌。抗生素一般是要用0.22um无菌滤器过滤后加入到灭过菌的温的培养基中倒平板。如果你将要以这种放线菌为材料做研究，需要摸清它的耐 ...

多谢指点！
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仰望星空脚踏实地
12楼2012-06-25 15:58:16
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swallow1969

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by kedaxiaoyu at 2012-06-25 15:35:30
加到培养基里直接灭菌即可，微孔滤膜可以的话灭一下菌再用。

谢谢！
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仰望星空脚踏实地
13楼2012-06-25 16:00:34
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swallow1969

银虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by yc652090251 at 2012-06-25 15:51:09
培养基灭好后，倒板前待培养基不太烫的时候每100ml加入100μl（50mg/ml）放线菌酮。要是抑制细菌每100ml培养基加入200-400μl（10mg/ml）萘啶酮酸。

谢谢！
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仰望星空脚踏实地
14楼2012-06-25 16:01:50
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fenghan06

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by swnz at 2012-06-25 15:44:12
以前做过稀有放线菌筛选有点经验。不外乎用抗生素、高温、贫瘠培养基等条件控制杂菌。抗生素一般是要用0.22um无菌滤器过滤后加入到灭过菌的温的培养基中倒平板。如果你将要以这种放线菌为材料做研究，需要摸清它的耐 ...

另外附加个保存菌苗的措施

我们实验室在收集菌苗时候会零下80-90度收藏， 拿出来时候是放置于干冰里的。

此外， 为了保险起见， 还会在玻璃管里真空下超低温把水分抽干， 然后用高温把玻璃管封闭起来， 里面保持无水分真空状态， 可以在5度下保持数十年或者上百年。 这个也是我们实验室收集菌苗的时候必做的措施 （我们实验室有~9000个菌苗， 如果要长期性的保持这么庞大的菌苗库， 严格的管理可以接触主要菌苗库的人是必要的).

跑题了， 不过只是想分享下自己经验。 我看过有一些别的实验室在菌苗收集上做得很乱， 前阵子有个认识的博士生的保存在低温下的菌苗就完蛋了， 结果一个文章不能发表。
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swallow1969
15楼2012-06-25 21:00:30
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克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)

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★ ★ ★
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swallow1969: 金币+3, ★有帮助 2012-06-26 09:14:51
真菌必须加制霉菌素啊...
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16楼2012-06-25 21:26:13
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mlanqiang

木虫之王 (文学泰斗)

蓝博士

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
swallow1969: 金币+2, ★有帮助 2012-06-26 09:15:00
将纳他霉素加量增加一些看看。
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蓝精灵
17楼2012-06-25 21:34:30
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swallow1969

银虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
15楼: Originally posted by fenghan06 at 2012-06-25 21:00:30
另外附加个保存菌苗的措施

我们实验室在收集菌苗时候会零下80-90度收藏， 拿出来时候是放置于干冰里的。

此外， 为了保险起见， 还会在玻璃管里真空下超低温把水分抽干， 然后用高温把玻璃管封闭起来， 里面 ...

非常感谢你的经验分享，我也正在考虑菌种保藏的问题，你的经验值得借鉴。
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仰望星空脚踏实地
18楼2012-06-26 09:14:34
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eric211

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
swallow1969: 金币+3, ★有帮助 2012-06-27 08:15:31
抗生素最好用一次性滤膜过滤加入到培养基，很多抗生素在高温下不稳定；如果被污染了，可以用划线培养法挑单菌落，在筛选培养基中。由于放线菌生长较真菌、细菌慢，所以要随时观察平板上的菌落形态，及时纯化。
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respectissomethingyouhavetohaveinordertoget!
19楼2012-06-26 13:34:06
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zhenlisha

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
swallow1969: 金币+2, ★有帮助 2012-06-27 08:15:41
高氏一号培养基加重铬酸钾抑制真菌
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20楼2012-06-26 21:34:46
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