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swallow1969

银虫 (小有名气)

[求助] 如何抑制放线菌培养时污染的真菌?

前段分离的放线菌被真菌污染了,请教下各位如何能够去除?资料显示可用制霉菌素或那他霉素?具体使用方法该怎样?是溶解后直接加到培养基里,还是先加到培养基里再高压灭菌后使用?用什么溶解?浓度大约多少?请大家给个具体点的方案!
另外,再问一下微孔滤膜是直接使用,还是灭菌后使用啊?
一并谢谢!
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仰望星空脚踏实地
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fenghan06

银虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by swnz at 2012-06-25 15:44:12
以前做过稀有放线菌筛选有点经验。不外乎用抗生素、高温、贫瘠培养基等条件控制杂菌。抗生素一般是要用0.22um无菌滤器过滤后加入到灭过菌的温的培养基中倒平板。如果你将要以这种放线菌为材料做研究,需要摸清它的耐 ...

另外附加个保存菌苗的措施

我们实验室在收集菌苗时候会零下80-90度收藏, 拿出来时候是放置于干冰里的。

此外, 为了保险起见, 还会在玻璃管里真空下超低温把水分抽干, 然后用高温把玻璃管封闭起来, 里面保持无水分真空状态, 可以在5度下保持数十年或者上百年。 这个也是我们实验室收集菌苗的时候必做的措施 (我们实验室有~9000个菌苗, 如果要长期性的保持这么庞大的菌苗库, 严格的管理可以接触主要菌苗库的人是必要的).

跑题了, 不过只是想分享下自己经验。 我看过有一些别的实验室在菌苗收集上做得很乱, 前阵子有个认识的博士生的保存在低温下的菌苗就完蛋了, 结果一个文章不能发表。

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15楼2012-06-25 21:00:30
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wgy2007

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
swallow1969: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-06-25 15:59:40
纳他霉素加量为万分之二~千分之二,加到培养基里直接灭菌即可。
2楼2012-06-25 13:07:56
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lihao1988903

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
swallow1969: 金币+5 2012-06-25 15:59:52
看你放线菌什么抗性,培养时污染的话,直接加到培养时的培养基里就行。最好是涂个抗性平板筛选一下再挑但菌落培养。
3楼2012-06-25 13:54:55
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mada1986

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
swallow1969: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-06-25 16:00:06
楼上正解 抗性平板是王道啊 不过楼主自己的放线菌是什么抗性的要能清楚啊
4楼2012-06-25 14:51:37
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