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swallow1969

银虫 (小有名气)

[求助] 如何抑制放线菌培养时污染的真菌?

前段分离的放线菌被真菌污染了,请教下各位如何能够去除?资料显示可用制霉菌素或那他霉素?具体使用方法该怎样?是溶解后直接加到培养基里,还是先加到培养基里再高压灭菌后使用?用什么溶解?浓度大约多少?请大家给个具体点的方案!
另外,再问一下微孔滤膜是直接使用,还是灭菌后使用啊?
一并谢谢!
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仰望星空脚踏实地
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yc652090251

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
swallow1969: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-06-25 16:01:58
zhang8826857: 金币+1, 鼓励交流 2012-06-25 23:52:58
培养基灭好后,倒板前待培养基不太烫的时候每100ml加入100μl(50mg/ml)放线菌酮。要是抑制细菌每100ml培养基加入200-400μl(10mg/ml)萘啶酮酸。
低调做人好么~~
10楼2012-06-25 15:51:09
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普通回帖

wgy2007

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
swallow1969: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-06-25 15:59:40
纳他霉素加量为万分之二~千分之二,加到培养基里直接灭菌即可。
2楼2012-06-25 13:07:56
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lihao1988903

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
swallow1969: 金币+5 2012-06-25 15:59:52
看你放线菌什么抗性,培养时污染的话,直接加到培养时的培养基里就行。最好是涂个抗性平板筛选一下再挑但菌落培养。
3楼2012-06-25 13:54:55
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mada1986

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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swallow1969: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-06-25 16:00:06
楼上正解 抗性平板是王道啊 不过楼主自己的放线菌是什么抗性的要能清楚啊
4楼2012-06-25 14:51:37
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kedaxiaoyu

木虫 (职业作家)

神虫浮云

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
swallow1969: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-06-25 16:00:53
加到培养基里直接灭菌即可,微孔滤膜可以的话灭一下菌再用。
5楼2012-06-25 15:35:30
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swnz

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
swallow1969: 金币+10, ★★★很有帮助 2012-06-25 16:01:06
zhang8826857: 金币+3, 新虫加油 2012-06-25 23:52:49
以前做过稀有放线菌筛选有点经验。不外乎用抗生素、高温、贫瘠培养基等条件控制杂菌。抗生素一般是要用0.22um无菌滤器过滤后加入到灭过菌的温的培养基中倒平板。如果你将要以这种放线菌为材料做研究,需要摸清它的耐抗真菌抗生素的水平,运气不好污染的时候需要稀释涂布抗性平板,以获得纯的菌株。当然你需要超低温保存原始菌种才是最合理的。
跟着感觉走
6楼2012-06-25 15:44:12
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swallow1969

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wgy2007 at 2012-06-25 13:07:56
纳他霉素加量为万分之二~千分之二,加到培养基里直接灭菌即可。

谢谢啦!
仰望星空脚踏实地
7楼2012-06-25 15:46:23
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swallow1969

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by lihao1988903 at 2012-06-25 13:54:55
看你放线菌什么抗性,培养时污染的话,直接加到培养时的培养基里就行。最好是涂个抗性平板筛选一下再挑但菌落培养。

谢谢!
仰望星空脚踏实地
8楼2012-06-25 15:48:04
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swallow1969

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by mada1986 at 2012-06-25 14:51:37
楼上正解 抗性平板是王道啊 不过楼主自己的放线菌是什么抗性的要能清楚啊

谢谢提醒!
仰望星空脚踏实地
9楼2012-06-25 15:48:22
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