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xiongL铜虫 (小有名气)
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[求助]
什么有机溶剂不会使葡萄糖氧化酶变性？
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如题，我想找一种有机溶剂，能和水互溶，把葡萄糖氧化酶放入水——有机相中反应。有什么有机溶剂不会让酶变性的？或是变性很小，水：有机溶剂的配比？ |
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3楼2012-06-25 15:40:42
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【答案】应助回帖
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看来与水性质接近的有机物，比如少量甲醇或乙醇： 高纯度葡萄糖氧化酶为淡黄色粉末，易溶于水，完全不溶于乙醚、氯仿、丁醇、吡啶、甘油、乙二醇等。50％丙酮、66％甲醇能使其沉淀，一般制品中含有过氧化氢酶。分子量为150000左右，每摩尔酶含2摩尔FAD。酶的最大光吸收波长为377nm和455nm。在紫外光下无萤光，但是在热、酸或碱处理后具有特殊的绿色。固体酶制剂在0℃下保存至少稳定两年，在－15℃下稳定8年。葡萄糖氧化酶稳定的pH范围为3～4，最适pH5，如果没有葡萄糖等保护剂的存在，pH大于8或小于3，葡萄糖氧化酶将迅速失活。葡萄糖氧化酶的作用温度为30～60℃，该酶对EDTA、KCN及NaF不受阻抑，但HgCl、AgCl、对氯汞苯甲酸和苯肼对酶有阻抑。 葡萄糖氧化酶的催化特性： 葡萄糖氧化酶的每个酶分子中含有两单位FAD（黄素腺嘌呤=核苷酸），作为受氢体催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸，并产生过氧化氢： 葡萄糖氧化酶的催化反应，按条件不同有如下三种形式： 在没有过氧化氢酶存在下，每摩尔葡萄糖氧化酶氧化时消耗1摩尔氧气。 C6H12O6＋O2→C6H12O7＋H2O2 在有过氧化氢酶存在下，每摩尔葡萄糖氧化酶氧化时消耗0.5摩尔氧气。 C6H12O6＋1/2O2→C6H12O7 在有乙醇和过氧化氢酶存在下，过氧化氢同时被用于乙醇的氧化作用，此时，每摩尔葡萄糖氧化酶氧化时消耗1摩尔氧气。 C6H12O6＋C2H5OH＋O2→C6H12O7＋CH3CHO＋H2O 此外，葡萄糖氧化酶催化β－D－葡萄糖的速度要比催化α－D－葡萄糖的速度快150倍。 |
2楼2012-06-25 15:37:55
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