24小时热门版块排行榜    

查看: 6468  |  回复: 16

lqs075

银虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白胶脱色

最近跑蛋白,脱色总会出现下面这种情况,背景色好重,而且也换了好几次脱色液,也脱了至少两天了~~以前不会的。各位高手帮忙看看这是什么原因~~~急!非常感谢!
我不懂怎么上传图片,所以就以附件的形式上传了~~[ Last edited by lqs075 on 2012-6-22 at 20:30 ]
回复此楼

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈:小木虫仅提供交流平台,不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布,如果其内容涉及到知识产权问题,其责任在于用户本人,如对版权有异议,请联系邮箱:xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : SDC15597.JPG
  • 2012-06-22 20:30:06, 2.39 M

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

饼哥

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
lqs075: 金币+5, 有帮助 2012-06-25 01:29:53
一,使用新的电泳缓冲液。二,你的上样液中有不溶性物质,建议上样前12000rpm离心1min。三,你染色时间太长了,建议缩短染色时间,过夜脱色。
爱科研,更爱小木虫!
7楼2012-06-23 16:47:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

eagle311

铁杆木虫 (正式写手)

bioenergy

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
lqs075: 金币+2, 有帮助 2012-06-25 01:30:07
lqs075: 金币+3, 有帮助 2012-06-25 01:31:41
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助 2012-06-25 13:45:52
你这个是上样的问题,上样之前最后离心5min。可以避免不溶性的颗粒影响。上样量是多少,我看你有溢出。脱色的话,你可以用固定液(50%甲醇,5%乙酸)先脱色一次,这样效果好一点。此外,跑电泳电流不要太大,如果能在较低温度跑电泳带可能会好一些。你的带有些凌乱。
致力于工业微生物,尤其是生物制药方向
2楼2012-06-23 09:04:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hsuley

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有可能上样buffer污染了,重配上样buffer试试
3楼2012-06-23 10:09:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

毛桃就是我

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
染色时间长  脱色时间短   建议过夜脱色
木有签名呀!
4楼2012-06-23 12:01:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mlanqiang

木虫之王 (文学泰斗)

蓝博士

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
lqs075: 金币+1, 有帮助 2012-06-25 01:30:31
在上柱子之前还是需要离心一下了。
蓝精灵
5楼2012-06-23 12:54:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

maothree54

至尊木虫 (知名作家)

科学怪人

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
lqs075: 金币+2, 有帮助 2012-06-25 01:30:45
二楼正解!主要是电泳条件的设置问题,脱色基本上不需要什么技术含量的,一般40%甲醇、10%冰醋酸和50%水就可以了
多动大脑,严谨的搞科研!
6楼2012-06-23 14:32:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lqs075

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 毛桃就是我 at 2012-06-23 12:01:49
染色时间长  脱色时间短   建议过夜脱色

不只是过夜脱色了,我都脱了超过两天了
8楼2012-06-23 19:03:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lqs075

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 饼哥 at 2012-06-23 16:47:01
一,使用新的电泳缓冲液。二,你的上样液中有不溶性物质,建议上样前12000rpm离心1min。三,你染色时间太长了,建议缩短染色时间,过夜脱色。

我只染了2个半小时,会太长了吗?一般染多久呢?而且我脱色时间也很长,都超过两天了
9楼2012-06-23 19:05:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lqs075

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by eagle311 at 2012-06-23 09:04:58
你这个是上样的问题,上样之前最后离心5min。可以避免不溶性的颗粒影响。上样量是多少,我看你有溢出。脱色的话,你可以用固定液(50%甲醇,5%乙酸)先脱色一次,这样效果好一点。此外,跑电泳电流不要太大,如果能 ...

跑胶的时候浓缩胶用的电压是80V,分离胶用的是120V,这会大了吗?该用多大的呢?
10楼2012-06-23 19:09:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lqs075 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +12 爱看书的可乐 2026-08-26 14/700 2026-08-26 11:49 by coolysnow
[基金申请] 科研孤儿太难了 +21 我4大白菜 2026-08-20 22/1100 2026-08-26 11:29 by nlgza
[基金申请] 怎么查啊 +4 huang1991js 2026-08-26 4/200 2026-08-26 11:26 by panjy.cn
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 国合现在查不到了吗? +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +8 炎黄贵胄 2026-08-22 9/450 2026-08-26 07:47 by WASM
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +21 羊腰板 2026-08-21 24/1200 2026-08-26 07:20 by finnigan
[基金申请] 明天应该可查了!? +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 有没有大神帮我看看基金代码 28+4 1234567wang 2026-08-24 10/500 2026-08-25 19:15 by lfy8008
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[教师之家] 导师吐槽:我怎么摊上了这么个极品研究生! +3 苏东坡二世 2026-08-23 3/150 2026-08-25 10:35 by shisan1313
[基金申请] 我面上完蛋了 +13 且听虎啸 2026-08-20 14/700 2026-08-25 09:10 by mrkang
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +25 yaoyewhu2008 2026-08-20 27/1350 2026-08-25 08:01 by Equinoxhua
[基金申请] 让我中一个面上吧! +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
信息提示
请填处理意见