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lqs075

银虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白胶脱色

最近跑蛋白,脱色总会出现下面这种情况,背景色好重,而且也换了好几次脱色液,也脱了至少两天了~~以前不会的。各位高手帮忙看看这是什么原因~~~急!非常感谢!
我不懂怎么上传图片,所以就以附件的形式上传了~~[ Last edited by lqs075 on 2012-6-22 at 20:30 ]
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  • 附件 1 : SDC15597.JPG
  • 2012-06-22 20:30:06, 2.39 M

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饼哥

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
lqs075: 金币+5, 有帮助 2012-06-25 01:29:53
一,使用新的电泳缓冲液。二,你的上样液中有不溶性物质,建议上样前12000rpm离心1min。三,你染色时间太长了,建议缩短染色时间,过夜脱色。
爱科研,更爱小木虫!
7楼2012-06-23 16:47:01
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查看全部 17 个回答

eagle311

铁杆木虫 (正式写手)

bioenergy

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
lqs075: 金币+2, 有帮助 2012-06-25 01:30:07
lqs075: 金币+3, 有帮助 2012-06-25 01:31:41
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助 2012-06-25 13:45:52
你这个是上样的问题,上样之前最后离心5min。可以避免不溶性的颗粒影响。上样量是多少,我看你有溢出。脱色的话,你可以用固定液(50%甲醇,5%乙酸)先脱色一次,这样效果好一点。此外,跑电泳电流不要太大,如果能在较低温度跑电泳带可能会好一些。你的带有些凌乱。
致力于工业微生物,尤其是生物制药方向
2楼2012-06-23 09:04:58
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hsuley

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有可能上样buffer污染了,重配上样buffer试试
3楼2012-06-23 10:09:40
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毛桃就是我

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
染色时间长  脱色时间短   建议过夜脱色
木有签名呀!
4楼2012-06-23 12:01:49
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