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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 表达载体表达方向问题 顺时针还是逆时针 附图
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sugar900309

木虫 (小有名气)

[求助] 表达载体表达方向问题 顺时针还是逆时针 附图

表达载体如图

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1楼 2012-06-22 11:29:56
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jqq1985

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
看蓝色多克隆位点上游启动子方向，基因应该逆时针编码
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2楼2012-06-22 12:41:59
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小虫子666

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
逆时针的 2个35spromoter都是逆时针的
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3楼2012-06-22 16:27:25
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小虫子666

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
sugar900309: 金币+5, ★★★很有帮助, 已经解决 谢谢。。 2012-06-23 15:23:04
sugar900309: 回帖置顶 2012-06-23 15:23:29
补充：第二个35spromoter后接着一个NPT抗性标记，肯定是逆时针了
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4楼2012-06-22 16:32:41
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sugar900309

木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 小虫子666 at 2012-06-22 16:32:41
补充：第二个35spromoter后接着一个NPT抗性标记，肯定是逆时针了

还想请问题下 紫色箭头什么意思啊？我是新手，这些搞得我好晕啊。
还有 PMD18-T载体拿去测序 用M13F引物是不是就是由lacZ往后测啊 多谢指教，问题解决后 金币加倍给
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5楼2012-06-23 14:49:37
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小虫子666

铁杆木虫 (正式写手)
pCambi 应该是一个双元表达载体（真核超表达载体），多克隆位点这边是在真核系统表达的，LacZ这边在原核（大肠杆菌）系统表达的。

PMD18-T 我没用过，我在网上查了下测序用RV-M和M13-47  RV-M从LacZ开始测，M13-47从多克隆EcoR1后20个碱基开测。
你看到的载体图，下面一半都会有载体关键的信息。一个基因克隆用到得载体分2种，原核和真核。原核的载体表达式一个方向的。真核载体的表达2个方向，在原核中一个方向，真核中另一个方向，一般载体图上都会有LB和RB分隔开。慢慢看很容易的
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6楼2012-06-23 15:51:21
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