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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 碳水化合物 » DEAE-52纤维素柱求助
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guoyongyue

新虫 (初入文坛)

[求助] DEAE-52纤维素柱求助 已有2人参与

现在在做食用菌子实体多糖的分离纯化，我用的是DEAE-52的纤维素柱，用0.05到0.5的NaCl 梯度洗脱，1.25ml/min，上样量是1mg/ml 的多糖10ml，每管收集5ml，过了两次，也有峰，但是纯品太少，没办法富集，还想拿到纯品，怎么办呢？
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1楼 2012-06-13 10:09:29
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小橘子2013

新虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by lezai945 at 2012-11-16 11:16:22
多糖醇沉的时候确实有两层上面漂浮的一层是胶体状的，下面一层是沉淀。胶体状的我没做过，我做的是下面的沉淀。我有以下建议:
建议一：柱子的规格。如果想大量的制备，当然是选择稍稍大的柱子。直径在2.0cm以上。
...

你好我在做一种蛋白分分离纯化工艺，
目前流程是这样：大肠杆菌中诱导表达，破碎取上清直接过离子交换再过分子筛；
只是探索下条件，而且我没有做过，有几个问题想问一下：
1：破碎后的上清可以直接过离子交换吗？一般的离子交换柱子应该用多大的？怎样选择？
我买了一个10cm的小柱子，打算装2ml的柱床可以吗？上样量有没有要求？
2：我的目的蛋白是19.8KD，过分子筛用sephadex-G50可以吗？这个柱子应该用多大的可以？
这方面接触比较少，还希望不吝赐教
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简简单单才是真
20楼2016-03-22 14:57:57
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hsd3521

主管区长 (知名作家)

火星驻地球联络处主任科员

优秀区长优秀版主优秀版主
非应助，自己也是在学习中，DE52不耐压，如果加大盐离子浓度可以不？不梯度洗脱，直接用一较高盐离子浓度洗脱液洗脱
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guoyongyue
太胖了！~
3楼2012-06-13 21:27:50
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guoyongyue

新虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by hsd3521 at 2012-06-13 21:27:50
非应助，自己也是在学习中，DE52不耐压，如果加大盐离子浓度可以不？不梯度洗脱，直接用一较高盐离子浓度洗脱液洗脱

好像不行~
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4楼2012-06-13 21:52:31
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zhh8672

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
guoyongyue: 金币+10, ★★★很有帮助, 有帮助 2012-06-15 11:29:45
有几个峰呢？建议从水开始，慢慢的把盐离子浓度增大，一般DEAE收集的组分可以将峰两边一起收集，只用这个填料很难得到高纯度的样品，还需要进一步的分离
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5楼2012-06-15 08:57:06
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