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Rafael007金虫 (小有名气)
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[求助]
请教各位大虫uplc峰型的问题，谢谢
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各位大虫门大家好，小虫现在有一色谱条件的问题请教大家，对于大家的帮助先在此谢过，每位回复的虫友我都会相应的赠送金币，谢谢。 问题是这样的，我最近在做几种二萜生物碱的分析，用的是uplc来做的，根据文献上的相关报道，选用的流动相是乙腈—10mmol/L碳酸氢铵（加氨水调至ph=10.5）溶液，选用的色谱柱是uplc的耐碱柱BEH C18，但是最后跑下来的结果是有些峰前延严重，峰型较差，下图中标的1号峰峰型还好，就是后面的五个峰型较差，想在此向大家请教这是什么原因，如何改善，要是都能像1号峰峰型就好了。谢谢大家。 图一是混标的色谱图，只有峰一峰型比较好，后面几个峰如何才能像峰一那样。 图二是混标和单标的对比图，放大之后，其他峰的峰型明显不好，基线也不平，如何调整呢。  这是图一，混标，只有峰一较好，其他的几个峰型都比较差  这是图二，混标和单标的对比图，单标放大后，峰型特别丑，而且基线特别的不平，我用的溶剂是二氯甲烷 [ Last edited by Rafael007 on 2012-6-9 at 16:33 ] |
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houqian387
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【答案】应助回帖
★ ★
Rafael007: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-06-12 14:23:45
Rafael007: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-06-12 14:23:45
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1、首先回答你二氯甲烷的问题 二氯甲烷和反相的水不互溶，当二氯甲烷带着样品进入色谱系统的时候，不能很好的和流动相互溶，导致样品不能和色谱柱发生正常的分配作用，出来的峰有可能不是正态分布。还有一点：二氯甲烷会损伤C4,8,18这样的色谱柱。 2,、再说运行时间的问题，大多数情况下（分离，峰形，定量可接受），运行时间要根据色谱峰的k值来定，k值在2-10左右的运行时间是最合适的。 k= （保留时间-死时间）/死时间 希望能帮到你 |
Rafael00718楼2012-06-12 11:21:50
xbqewpq
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