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双酶切，切不下来
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小弟第一次够载体，片段大小大约一千三，酶切位点为hind111&noc1（没有设置保护碱基），之前切t载体，切载体，切片段都是成功的，然后将目的片段和载体连接导入大肠杆菌后，涂板子，挑菌落，做菌落pcr，显示有带，做质粒pcr验证显示也有目的带（可不可以说，片段是连到质粒上去了的？）但是酶切没结果，单酶切和双酶切条带基本一样。这个问题困扰我近半个月了，反反复复做了好几次都一样。 ps.质粒是用安比奥的试剂盒提的。 求大神帮忙指点，感激不尽！ [ Last edited by 1949stone on 2012-6-9 at 13:02 ] |
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lihao1988903
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jimjohntall
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