24小时热门版块排行榜    

查看: 2941  |  回复: 19
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

hubohuna

新虫 (初入文坛)

[求助] 双酶切,切不下来

小弟第一次够载体,片段大小大约一千三,酶切位点为hind111&noc1(没有设置保护碱基),之前切t载体,切载体,切片段都是成功的,然后将目的片段和载体连接导入大肠杆菌后,涂板子,挑菌落,做菌落pcr,显示有带,做质粒pcr验证显示也有目的带(可不可以说,片段是连到质粒上去了的?)但是酶切没结果,单酶切和双酶切条带基本一样。这个问题困扰我近半个月了,反反复复做了好几次都一样。
ps.质粒是用安比奥的试剂盒提的。
求大神帮忙指点,感激不尽!

[ Last edited by 1949stone on 2012-6-9 at 13:02 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hubohuna

新虫 (初入文坛)

衷心感谢各位同仁,我打算先送测序,没结果的话就重新定引物了,再次感谢各位!
14楼2012-06-11 10:46:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 20 个回答

hubohuna

新虫 (初入文坛)

质粒大概5kbp的样子
2楼2012-06-08 18:44:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

swky

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

3楼2012-06-08 18:51:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jimjohntall

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
1949stone: 回帖置顶 2012-06-08 21:50:58
1949stone: 金币+1, 鼓励 2012-06-08 21:51:06
有没有作对照,提取质粒做酶切双切如果得不到目的片段,你可以试试单酶切,看一下大小的。你选的酶,酶切位点在目的片段中有没有,是不是唯一的。
4楼2012-06-08 19:32:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 QTy3jDtz1uLt 2026-08-21 10/500 2026-08-22 23:42 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +11 羊腰板 2026-08-21 11/550 2026-08-22 22:03 by lsbin3733
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 3/150 2026-08-22 22:03 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-22 21:54 by OEbVnUOu01ol
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 7/350 2026-08-22 21:39 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +3 zjuhero 2026-08-22 4/200 2026-08-22 20:02 by mycsru
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[教师之家] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 4/200 2026-08-22 16:52 by sunzitan
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
信息提示
请填处理意见