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| 实验室毕业的一个师兄筛了一个水解酶的突变株,突变位点在催化中心之外,催化效率提高了4倍还发了文章,但是我现在用他的突变质粒转化来表达这个突变酶却没有活力了,很奇怪,质粒是pET22b(+),宿主菌是BL21(DE3),转化后挑了10个菌落,37℃培养到OD值0.68,加入终浓度为0.2mM的IPTG,25℃诱导表达5h测活力,同时用没有突变的原始酶做了对照,原始酶有酶活,突变酶就是没有 |
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gaoyang636
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