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a317236770

木虫 (小有名气)

[求助] 考马斯亮蓝

我想问一下，考马斯亮蓝溶液使用前有人用滤纸过滤，我用有机膜或水膜可以吗？会不会影响滤液中考马斯亮蓝的浓度？如果不行，为什么？谢谢！
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1楼 2012-05-29 21:23:51
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
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yqbter: 金币+2, 感谢应助！ 2012-05-30 08:07:07
考马斯亮蓝配置后往往会有不容的凝块，如果不滤去，在给蛋白染色时会局部浓度过大，导致结果不准。由于凝块一般较大，用滤纸过滤即可。用滤膜我觉得也可以，但完全没有必要，滤膜常是0.45 微米或0.22微米规格的，用来滤考马斯亮蓝太浪费。另外，应根据配置时的溶剂选择对应滤膜。
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2楼2012-05-29 22:15:21
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★
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a317236770: 金币+1, ★有帮助 2012-06-04 20:30:37
很简单，用那么小孔径的滤膜会堵塞，如果坚持要用，那就要时不时的拆滤膜出来冲洗再装回去继续抽滤。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
3楼2012-05-30 05:43:11
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a317236770

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2012-05-29 22:15:21
考马斯亮蓝配置后往往会有不容的凝块，如果不滤去，在给蛋白染色时会局部浓度过大，导致结果不准。由于凝块一般较大，用滤纸过滤即可。用滤膜我觉得也可以，但完全没有必要，滤膜常是0.45 微米或0.22微米规格的，用 ...

我用滤膜过完后，每个样品的吸光度比以前偏低了，是不是考马斯亮蓝过滤时被截留了？
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4楼2012-05-30 08:22:01
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肖颖2009

铁虫 (正式写手)
你们配置的考马斯染液还要滤啊？我们一般配好就直接用了，但是一定是要搅拌好，使之完全溶解的。
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5楼2012-05-30 11:14:37
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
a317236770: 金币+1, ★有帮助 2012-06-04 20:31:38
引用回帖:
5楼: Originally posted by 肖颖2009 at 2012-05-30 11:14:37
你们配置的考马斯染液还要滤啊？我们一般配好就直接用了，但是一定是要搅拌好，使之完全溶解的。

我觉得最好滤一下，考马斯亮蓝配好后无论怎么搅拌，总会有一些小凝块存在，你觉得完全溶解，估计放一段时间，也可以在瓶底看到沉淀。如果不过滤，起码静置一段时间，取上清用
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6楼2012-05-30 16:45:27
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jasonwyb123

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
太奢侈了吧
用滤纸就好
我就是用whatman滤纸过滤的，没有任何影响
滤膜也太贵了吧
滤纸如果堵了就换一个 反正不是很贵的说
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7楼2012-06-01 15:40:01
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