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a317236770

木虫 (小有名气)

[求助] 考马斯亮蓝

我想问一下,考马斯亮蓝溶液使用前有人用滤纸过滤,我用有机膜或水膜可以吗?会不会影响滤液中考马斯亮蓝的浓度?如果不行,为什么?谢谢!
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
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yqbter: 金币+2, 感谢应助! 2012-05-30 08:07:07
考马斯亮蓝配置后往往会有不容的凝块,如果不滤去,在给蛋白染色时会局部浓度过大,导致结果不准。由于凝块一般较大,用滤纸过滤即可。用滤膜我觉得也可以,但完全没有必要,滤膜常是0.45 微米或0.22微米规格的,用来滤考马斯亮蓝太浪费。另外,应根据配置时的溶剂选择对应滤膜。
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
2楼2012-05-29 22:15:21
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
a317236770: 金币+1, 有帮助 2012-06-04 20:30:37
很简单,用那么小孔径的滤膜会堵塞,如果坚持要用,那就要时不时的拆滤膜出来冲洗再装回去继续抽滤。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
3楼2012-05-30 05:43:11
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a317236770

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2012-05-29 22:15:21
考马斯亮蓝配置后往往会有不容的凝块,如果不滤去,在给蛋白染色时会局部浓度过大,导致结果不准。由于凝块一般较大,用滤纸过滤即可。用滤膜我觉得也可以,但完全没有必要,滤膜常是0.45 微米或0.22微米规格的,用 ...

我用滤膜过完后,每个样品的吸光度比以前偏低了,是不是考马斯亮蓝过滤时被截留了?
4楼2012-05-30 08:22:01
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肖颖2009

铁虫 (正式写手)

你们配置的考马斯染液还要滤啊?我们一般配好就直接用了,但是一定是要搅拌好,使之完全溶解的。
5楼2012-05-30 11:14:37
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖


a317236770: 金币+1, 有帮助 2012-06-04 20:31:38
引用回帖:
5楼: Originally posted by 肖颖2009 at 2012-05-30 11:14:37
你们配置的考马斯染液还要滤啊?我们一般配好就直接用了,但是一定是要搅拌好,使之完全溶解的。

我觉得最好滤一下,考马斯亮蓝配好后无论怎么搅拌,总会有一些小凝块存在,你觉得完全溶解,估计放一段时间,也可以在瓶底看到沉淀。如果不过滤,起码静置一段时间,取上清用
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
6楼2012-05-30 16:45:27
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jasonwyb123

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
太奢侈了吧
用滤纸就好
我就是用whatman滤纸过滤的,没有任何影响
滤膜也太贵了吧
滤纸如果堵了就换一个 反正不是很贵的说
7楼2012-06-01 15:40:01
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