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打哈欠的人

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

楼主后来进展如何?
我也遇到了相同问题……刚刚发了一个贴求助……好吧,我应该先检索一下再提问的
我也是仅对脾进行了红细胞裂解的处理。文献中说要加辅助性细胞,我们没有纯化过应该不需要吧?
还有培养基的问题,是不是需要加巯基乙醇、HEPES?
刺激物光用conA行吗?有的还加了IL-2,各种各样的
CFSE您用的多少浓度呀?貌似40μM也可以……
11楼2015-05-31 15:58:14
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听晨聆风

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 眼镜蛇 at 2012-06-16 00:14:05
有时候也不一定是浓度问题,是cfse变质了,本来是无色的,如果出现淡黄或者其他颜色,肯定不能用了。

你好,你说的本来是无色的,指的是溶液无色,还是粉末无色?我之前用的CFSE,用DMSO溶解以后是无色的,等到我用PBS将它再次稀释,它就变成了黄色的,但是我一直用这个试剂做,没有问题。现在我又重新买了CFSE,用DMSO溶解以后以及用PBS再次溶解后,都是无色的,这是为什么呢?期待亲的回答

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12楼2018-11-14 18:33:53
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听晨聆风

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by krissy at 2012-09-05 17:02:06
正常情况下CFSE高低浓度都是无色的,在染了细胞之后,将细胞离心沉淀下来才显示黄色,高浓度颜色深一些,低浓度颜色浅些

我之前用的CFSE用90uLDMSO溶解以后是无色的,等到我再用PBS再次稀释,就变成了黄色,并且随着时间的延长,颜色越深,不过实验倒是没什么问题。但是这次买的不论是第一次溶解,还是再次稀释,颜色都没有变化。我想问它会变黄是什么原因呢?

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13楼2018-11-14 18:37:42
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